产品名称:鸡痘病毒PCR试剂盒
英文名称:Fowlpox Virus(FPV)PCR
编号: FSP1674
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
CRHBP促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白抗体特价促销anti- GGA1 antibody活检组织固着液凋亡相关蛋白6抗体
CPN2羧肽酶CPN2抗体特价促销anti- GGA2 antibody抗原保护固着液(10%中性Formalin 固着液)凋亡相关蛋白7抗体
Fetuin beta胎球蛋白B抗体(Fetuin β)特价促销anti- GGCT antibody免疫荧光样品固着液(Michel固着液)调亡诱导因子家族蛋白PEF1抗体
GGT6γ-谷氨酰转肽酶6抗体特价促销anti- GGCX antibody胃肠组织固着液(Hollande固着液)酸性核磷蛋白32家族B抗体
GPLD1/GPI-PLD糖蛋脂酶D抗体特价促销anti- GGPS1 antibody前列腺固着液(Hollande固着液)前列腺素EP1受体抗体
AQP2水通道蛋白-2抗体特价促销anti- GGT7 antibody肾组织固着液(BUBOSCQ-BRAZIL固着液)脯氨酸水解酶4抗体
HABP2透明质酸结合蛋白2抗体特价促销anti- GH2 antibody脑组织固着液(Bouin固着液)程序性细胞死亡2抗体
HPR结合珠蛋白相关蛋白抗体特价促销anti- GHDC antibody肾上腺固着液(Orth固着液)磷酸核糖胺咪唑羧化酶抗体
鸡痘病毒PCR试剂盒Delacroixia coronata (Costantin) Saccardo e ..COMTD1/AVSD2 富含半胱氨酸与表皮生长因子样蛋白2抗体鹦鹉喙羽病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒Rapamycin 雷帕霉素
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..CRELD2 富含半胱氨酸与表皮生长因子样蛋白2抗体球孢白僵菌探针法荧光定量PCR试剂盒Rapamycin 雷帕霉素
frozenCRYZL1 醌氧化还原酶样蛋白1抗体贝氏贝诺孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒Roxithromycin 罗红霉素
Escherichia hermannii Brenner et al.CSMD2 CSMD2蛋白抗体海藻百伯史坦菌探针法荧光定量PCR试剂盒Spectinomycin 盐酸壮观霉素
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Histone H3 (mono methyl K79) 单甲基组蛋白H3K9抗体两岐双岐杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Spectinomycin 盐酸壮观霉素
Candida inconspicua (Lodder et Kreger-van R ..CCDC18 卷曲螺旋结构域蛋白18抗体长双歧杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Spiramycin 螺旋霉素
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..CSMD3 CSMD3蛋白抗体双歧杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒Streptomycin 硫酸链霉素
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..CSTP1 钙调神经磷酸酶CSTP1抗体病毒探针法荧光定量PCR试剂盒Streptomycin 硫酸链霉素