储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:丹毒丝菌属通用PCR检测试剂盒
英文名称:Erysipelothrix sppPCR
编号: FSP1640
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
C17orf9717号染色体开放阅读框97抗体特价促销anti- FN3KRP antibody血清/血浆游离脂肪酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒造血干细胞抗原CD133相关蛋白抗体
p53 (DO-1)肿瘤抑制基因p53抗体特价促销anti- FNDC3A antibody人血液补体蛋白C3免疫比浊法定量检测试剂盒原钙粘蛋白1抗体
Apg10自噬相关蛋白10抗体特价促销anti- FNDC3B antibody人补体蛋白C3标准溶液缺陷性分配同源物α抗体
GPV/Goose parvovirus鹅细小病毒GPV抗体特价促销anti- FNDC5 antibody人血液补体蛋白C4免疫比浊法定量检测试剂盒表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体
C18orf118号染色体开放阅读框1抗体特价促销anti- FNIP1 antibody人补体蛋白C4标准溶液原钙粘蛋白介导的PCDHαC2受体抗体
RBFA核糖体结合因子RBFA抗体特价促销anti- FNTA antibody人血液C-反应蛋白(C-RP)免疫比浊法定量检测试剂盒小鼠抗p21激活激酶4抗体
Apg12自噬相关蛋白12抗体特价促销anti- FNTB antibody人C-反应蛋白标准溶液蛋白质磷酸酶2A亚基3抗体
pan 14-3-314-3-3蛋白抗体特价促销anti- Follistatin antibody人血液胰岛素免疫比浊法定量检测试剂盒非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗体
丹毒丝菌属通用PCR检测试剂盒Homo sapiens, humanphospho-CK II beta(Ser209) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗体长春新碱酸二氢进口/国产S100A7/Psoriasin S100钙结合蛋白A7抗体含量:比色法含量测定
Basidiobolus ranarum Eidam, teleomorphDUSP26/MKP8 双特异性蛋白磷酸酶26抗体(丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶8)γ-戊内酯长春进口/国产RBBP6 视网膜母细胞瘤结合蛋白6抗体含量:含量测定(UV)
Fusarium oxysporum f. sp.melonis Snyder ..phospho-FER/TYK3(Tyr402) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶3抗体γ-戊内酯盐酸咪达普利进口/国产S100PBP/S100P binding protein S100P结合蛋白抗体含量:HPLC法含量测定
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..GAK protein 细胞周期蛋白G相关激酶抗体4-乙烯基苄氯盐酸艾司洛尔进口/国产SAMD14 SAMD14抗体含量:含量测定
Candida aglyptinia Suh et al.phospho-LATS1+LATS2 (Thr1079 +Thr1041) 磷酸化肿瘤抑制基因LATS1/LATS2抗体4-乙烯基苄氯酸喹进口/国产CDMP1/GDF5 软骨衍生形态发生蛋白1抗体含量:UV法含量测定
Pyricularia oryzae Cavara, anamorphMOBKL2B Mob1同源蛋白MOBKL2B抗体五氧钒瑞格列进口/国产RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2) 酸化RNA聚合酶II CTD抗体含量:HPLC法含量测定
Homo sapiens, humanMOBKL2C Mob1同源蛋白MOBKL2C抗体五氧钒盐酸伐昔洛韦进口/国产RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S5) 酸化RNA聚合酶II CTD抗体含量:HPLC法含量测定
Proteus mirabilis HauserN acetylglucosamine kinase N-乙酰氨基葡萄糖激酶抗体维生素E聚乙二醇琥珀酸酯奥美拉唑钠进口/国产RNASE4/Angiogenin 血管生成核糖核酸酶4抗体(肌性侧索硬化症蛋白)含量:含量测定
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。