产品名称:粪肠球菌PCR试剂盒
英文名称:Enterococcus faecalis PCR
编号: FSP1608
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
MURF2肌肉特异性环指蛋白2抗体特价促销anti- F7 antibodyTRITC红色荧光光标记一抗嗅觉受体家族2亚基4抗体
MURF3肌肉特异性环指蛋白3抗体特价促销anti- F9 antibodyHRP标记一抗嗅觉受体家族5亚基3抗体
SMURF1Smad蛋白E3泛素连接酶1抗体特价促销anti- FA2H antibody前列腺肿瘤CAG三联子定量试剂盒嗅觉受体家族10亚基J3抗体
p150 CAF1染色质组装因子1P155抗体特价促销anti- FA5 antibody人体肿瘤β-catenin突变巢式分析试剂盒眼部白化病相关蛋白OA1/蛋白偶联受体143抗体
p55/DCAF1染色质组装因子1P55抗体特价促销anti- FAAH antibody人体肿瘤β-catenin突变荧光分析试剂盒视神经萎缩相关蛋白1抗体
DCAF12/WDR40A癌中心体相关蛋白抗体特价促销anti- FABP1 antibody直肠肿瘤标记波形纤维蛋白粪便检测试剂盒螺旋转录因子OTP抗体
DCAF13DCAF13蛋白抗体特价促销anti- FABP2 antibody直肠肿瘤标记K-ras粪便检测突变巢式分析试剂盒少突胶质细胞转录因子3抗体
phospho-gp130(Ser 782)磷酸化gp130抗体特价促销anti- FABP3 antibody直肠肿瘤标记K-ras粪便检测突变荧光分析试剂盒嗅觉受体家族5亚基1抗体
粪肠球菌PCR试剂盒Human METT10D ELISA KitPorimin 前细胞胀亡受体诱导膜损伤蛋白抗体三光气酸倍他索进口/国产LDHD 酸脱氢酶D抗体含量:含量测定
Human MFN1 ELISA KitTRAF7 肿瘤坏死因子受体相关因子7抗体三光气多潘立进口/国产ENO1+ENO2+ENO3 神经元,肌肉特异性醇化酶抗体含量:含量测定
Human METTL11A ELISA KitZDHHC16 细胞凋亡调控蛋白ZDHHC16抗体四氟对苯二腈法莫替进口/国产AKR1B10 糖还原酶相关蛋白质抗体含量:含量测定
Human METTL5 ELISA KitDR6/CD358 肿瘤细胞调亡素/肿瘤坏死因子受体死亡受体6抗体四氟对苯二腈枸橼酸己定进口/国产HBAB/AKR1C2 胆汁酸结合蛋白DDH2抗体含量:鉴别
Human METTL3 ELISA KitBCCIP/TOK1 乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗体衣霉素维A酸进口/国产Acylglycerol Kinase 甘油酯激酶线粒体抗体含量:含量测定
Human MIER3 ELISA KitAmphiphysin 神经元突触前膜蛋白抗体钛粉氢嗪进口/国产CYP2W1 细胞色P450 2W1抗体含量:含量测定
Human METTL4 ELISA KitWISP39/FKBPL p21调控蛋白WISP39抗体钛粉盐酸阿米洛利进口/国产CHDH/Choline dehydrogenase 胆脱氢酶抗体含量:含量测定
Human CALB2(Calretinin) ELISA KitRBM38 RNA结合蛋白38抗体2-噻吩乙酰氯3,5-二氨-6-吡嗪-2-羧酸酯进口/国产ENPP2 核苷酸焦酸酶2抗体含量:检查