储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:肠道致细胞病变人孤儿病毒PCR检测试剂盒
英文名称:Enteric Cytopathic Human Orphan Virus(ECHO)RTPCR
编号: FSP1598
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
CP110中心体蛋白110抗体特价促销anti- ERK1/2 antibodyHRP生物素稳定/稀释溶液跨膜受体蛋白Notch-3抗体
KATNA1/Katanin p60 A1剑蛋白p60亚基A1抗体特价促销anti- ERLIN1 antibodyAP生物素稳定/稀释溶液类固醇受体激活蛋白3抗体
ACTR1A (α/β-centractin)肌动蛋白相关蛋白1抗体特价促销anti- ERLIN2 antibody荧光生物素稳定/稀释溶液NK细胞受体2A抗体
GPSM2G蛋白信号调节蛋白2抗体特价促销anti- ERMAP antibody通用型HRP复合物稳定/稀释溶液轴索过度生长抑制因子A+B抗体 Nogo-B/A
HAUS4/C14orf9414号染色体开放阅读框94抗体特价促销anti- ERMP1 antibody酪胺信号扩增试剂盒神经元素3抗体
DIP2A/C21orf10621号染色体开放阅读框106抗体特价促销anti- ERO1L antibody生物素标记二抗DAB显色试剂盒轴突导向因子1抗体
MAP-9微管相关蛋白9抗体特价促销anti- ERO1LB antibodyFITC标记二抗POD转换试剂盒脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体
MAP7D1/RPRC1精氨酸/脯氨酸富含卷曲蛋白1抗体特价促销anti- ERO1LB antibody超敏型HRP-TMB底物显色试剂盒神经激肽A抗体
肠道致细胞病变人孤儿病毒PCR检测试剂盒Human MTHFD2(Methylenetetrahydrofolate dehydrogenase 2) ELISA KitRIP5/RIPK5 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶5抗体反式,反式-金合欢醇进口/国产Alpha 2 antiplasmin α2纤溶酶色上皮衍生因子抗体含量:含量测定
Human OAS2(2′-5′-oligoadenylate synthase 2) ELISA KitSPHK2 鞘氨醇激酶2抗体四氧化三钴邻位酚进口/国产SOX9/SRA1 转录因子SOX9蛋白抗体含量:GC法含量测定用
Human MRPL45 ELISA KitSTK3 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3抗体四氧化三钴唑呤进口/国产Thyroxine Binding Globulin/TBG/Serpin A7 状结合球蛋白抗体含量:检查
Human NPPC(C-type natriuretic peptide) ELISA KitIKIP IKK激酶相互作用蛋白抗体4-叔丁基苯基溴化镁萘普生进口/国产phospho-SOX9(Ser181) 酸化转录因子SOX9蛋白抗体含量:UV法含量测定
Human TTR(Transthyretin) ELISA KitAMACR/P504S α-甲基酰基辅酶A消旋酶抗体2,3,5-三氯吡啶泼尼松进口/国产H3-K4-HMTase SETD7 组蛋白H4-K4转移酶抗体含量:含量测定
Human DSG1(Desmoglein-1) ELISA KitCASC3/MLN51 肿瘤易感候选基因3抗体2,3,5-三氯吡啶青蒿琥酯进口/国产Slitrk1 神经突出相关蛋白Slitrk1抗体含量:检查
Human MS4A6A ELISA Kitphospho-IKKi/IKKe(Thr500) 磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体三氟乙酸右美沙芬进口/国产Sclerostin 骨形态发生抑制蛋白SOST抗体含量:含量测定
Human MPV17L ELISA KitTIAF1 TGFB1诱导抗凋亡因子1抗体三氟乙酸舒必利进口/国产SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2 肝细胞生长因子激活抑制蛋白2抗体含量:含量测定
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。