储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:大肠杆菌通用PCR含致病性和非致病性检测试剂盒
英文名称:E.coliPCR()
编号: FSP1574
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
AER61未知糖基化转移酶AER61抗体特价促销anti- EFTUD2 antibodyEstrogen Receptor beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)核因子1B抗体
ANKS1B/AIDA1β淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1抗体特价促销anti- Eg5 antibodyInsulin(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)维甲酸诱导神经母细胞瘤蛋白1抗体
ANKS3锚蛋白重复及SAM结构域蛋白3抗体特价促销anti- EGFL7 antibodyInsulin R-alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)转录延伸因子NELF抗体
ANKS6锚蛋白重复及SAM结构域蛋白6抗体特价促销anti- EGFR antibodyFSH-beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)蛋白激酶C结合蛋白NELL1抗体
ARSF芳香基硫酸酯酶F抗体特价促销anti- EGFR antibodyTSH-beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)蛋白激酶C结合蛋白NELL2抗体
ARSH芳香基硫酸酯酶H抗体特价促销anti- EGFR antibodyIL-1 alpha(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)核因子1A抗体
ARSK芳香基硫酸酯酶K抗体特价促销anti- EGFR-Specific antibodyIL-1 beta(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)环一螺旋蛋白1抗体
ART3二磷酸腺苷核糖基转移酶3抗体特价促销anti- EGLN1 antibodyIL-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)肿瘤转移抑制基因H4抗体
大肠杆菌通用PCR含致病性和非致病性检测试剂盒Human NUP107 ELISA KitEphB1+EphB2 酪氨酸蛋白激酶受体B1+B2抗体2,4,6-三苯基吡喃鎓四氟硼酸盐大蓟苷(柳穿鱼叶苷)进口/国产Adiponectin 脂联抗体含量:HPLC≥98%
Human NUP133 ELISA KitEphB1+EphB2+EphB3+EphB4 酪氨酸蛋白激酶受体B1+B2+B3+B4抗体3,3',5,5'-四甲基联苯胺 二盐酸盐(TMB HCL)2”-O-没食子酰金丝桃苷进口/国产APH1a 早老γ分泌酶抗体含量:HPLC≥98%
Human NUP160 ELISA KitANGPTL5 血管生成素相关蛋白53,3',5,5'-四甲基联苯胺 二盐酸盐(TMB HCL)9-喜树进口/国产Acrosin 顶体前体蛋白抗体含量:HPLC≥98%
Human F11(Coagulation factor XI) ELISA KitFGF11 成纤维细胞生长因子11抗体1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸石蒜进口/国产SNX25 分拣微管连接蛋白抗体含量:HPLC≥98%
Human NUP153 ELISA KitINPPL1 肌醇聚磷酸盐磷酸酶样蛋白1抗体1,2,3,4-四氢异喹啉光甘草定进口/国产ADM/AM/Adrenomedullin 上髓质抗体含量:HPLC≥98%
Human NUP50 ELISA KitTNFAIP2 肿瘤坏死因子诱导蛋白2(TNFα-IP 2)抗体2-三氟甲基-4-吡啶甲酸橙黄决明进口/国产ADM (ProAM-N20) 上髓质抗体(N端20肽)含量:HPLC≥98%
Human NUP205 ELISA KitCMG1 毛细管形态发生蛋白1抗体2-三氟甲基-4-吡啶甲酸荷叶进口/国产ADM R 上髓质受体抗体含量:HPLC≥98%
Human NUDT6 ELISA KitDENTT 细胞分裂核仁蛋白1抗体甲苯二异氰酸酯鹰嘴豆芽A进口/国产C CBL 原癌因CBL2抗体含量:HPLC≥99%
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。