隐孢子虫通用PCR检测试剂盒

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称：隐孢子虫通用PCR检测试剂盒
英文名称：Cryptosporidium spp.PCR
编号： FSP1538
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
Lin28RNA结合蛋白LIN28抗体特价促销anti- DHX29 antibody动物硬组织可溶性膜蛋白（粗提）制备试剂盒磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体

Phospho-BRCA1(Ser988)磷酸化癌易感基因1抗体特价促销anti- DHX32 antibody动物硬组织可溶性膜蛋白（纯提）制备试剂盒有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体

phospho-Cdc25B (Ser149)磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体特价促销anti- DHX35 antibody动物硬组织可溶性膜蛋白相位分离制备试剂盒磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体

phospho-GluR1(Ser849)磷酸化谷氨酸受体1抗体特价促销anti- DHX36 antibody真菌/酵母细胞可溶性膜蛋白（粗提）制备试剂盒肌球蛋白磷酸酶抗体

ZNF471锌指蛋白471抗体特价促销anti- DHX38 antibody真菌/酵母细胞可溶性膜蛋白（纯提）制备试剂盒磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体

Phospho-NMDAR2B (Tyr1474)磷酸化谷氨酸受体2B抗体特价促销anti- DHX57 antibody真菌/酵母细胞可溶性膜蛋白相位分离制备试剂盒线粒体内膜蛋白抗体

phospho-ATF2 (Thr53)磷酸化活化复制因子2抗体特价促销anti- DHX9 antibody通用包涵体蛋白溶解试剂盒丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体

phospho-ATF2 (Thr55)磷酸化活化复制因子2抗体特价促销anti- DIABLO antibody温和包涵体蛋白溶解试剂盒基质金属蛋白酶-8/胶原酶2抗体
隐孢子虫通用PCR检测试剂盒Human PHLDA2 ELISA KitTPD52/Prostate and colon associated protein  前列腺癌和结肠癌相关蛋白茶碱秋水仙进口/国产IKZF3  锌指蛋白Aiolos抗体含量：HPLC≥98%

Human PHLPPL ELISA KitTPD54/TPD52L2  肿瘤蛋白D54蛋白抗体三甲氧基氯硅烷薯蓣皂苷元进口/国产C3a Receptor/C3aR  过敏C3受体/补体C3受体抗体含量：HPLC≥98%

Human LRP8(Low-density lipoprotein receptor-related protein 8) ELISA KitTRIM47  星形细胞瘤高表达蛋白抗体（环指蛋白100）三甲氧基氯硅烷薯蓣皂苷进口/国产Alpha-ENaC  钠通道蛋白α ENaC含量：HPLC≥98%

Human PGRMC2 ELISA KitTSP50  肿瘤/睾丸抗原20抗体5,6,7,8-四氢喹啉原薯蓣皂甙进口/国产PLAGL2  多形性瘤因样蛋白2抗体含量：HPLC≥98%

Human PHKA2 ELISA KitTULP2/CT65/Cancer testis antigen 65  肿瘤/睾丸抗原655,6,7,8-四氢喹啉蛇床子进口/国产5HTR2C  5-羟色受体2C抗体含量：HPLC≥98%

Human PHACTR4 ELISA KitTERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase  端粒酶相关蛋白2抗体（端粒酶逆转录酶）6-三氟甲基吡啶-3-醛麝香进口/国产ROM-K/KCNJ1  ATP调节离子通道ROM K抗体含量：GC≥98%

Human PHACTR1 ELISA KitUBAP1  泛素相关蛋白1抗体（鼻咽癌相关基因20蛋白）6-三氟甲基吡啶-3-醛酚进口/国产Calsequestrin  肌钙集蛋白/收钙抗体含量：HPLC≥98%

Human PHAX ELISA KitUXT/Ubiquitously expressed transcript  广泛表达转录蛋白UXT抗体6-三氟甲基吡啶-3-醛水杨苷进口/国产Syncytin 1/HERV  合胞1抗体含量：HPLC≥98%
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。