储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:克罗诺杆菌通用PCR检测试剂盒
英文名称:Cronobacter spp.PCR
编号: FSP1532
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
BTBD3BTB/POZ结构域蛋白3抗体特价促销anti- DEK antibody载玻片细胞组蛋白荧光显微镜检测试剂盒基质金属蛋白酶-1抗体
BTBD10BTB/POZ结构域蛋白10抗体特价促销anti- Dematin antibody冰冻切片组织组蛋白荧光显微镜检测试剂盒基质金属蛋白酶13抗体
BTBD17BTB/POZ结构域蛋白17抗体特价促销anti- DENND1A antibody石蜡切片组织组蛋白荧光显微镜检测试剂盒基质金属蛋白酶-14抗体
ANGL2/ANGPTL2血管生成素样蛋白2抗体特价促销anti- DENND3 antibody载玻片细胞组蛋白NBT显色光学显微镜检测试剂盒基质金属蛋白酶3抗体
BTBD19BTB/POZ结构域蛋白19抗体特价促销anti- DENR antibody冰冻切片组织组蛋白NBT显色光学显微镜检测试剂盒基质金属蛋白酶-7抗体
GCLC/GCLMγ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗体(γ-GCSc)特价促销anti- DEPDC6 antibody石蜡切片组织组蛋白NBT显色光学显微镜检测试剂盒基质金属蛋白酶-9抗体
GCOM1GCOM1蛋白抗体特价促销anti- DEPDC6 antibody细胞组蛋白比色法定量检测试剂盒髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体
OGFOD2末端多聚腺苷酸2蛋白抗体特价促销anti- DEPP antibody细胞组蛋白荧光定量检测试剂盒多药耐药相关蛋白1抗体
克罗诺杆菌通用PCR检测试剂盒Human PITPNA ELISA KitSerca2/SERCA2 ATPase 肌浆/内质网钙ATP酶2抗体三[2-苯基吡啶-C2,N]铱(III)黄芪皂苷Ⅰ进口/国产TDRD9/HIG1 缺诱导蛋白HIG1抗体含量:HPLC≥98%
Human PIR ELISA KitAP2 gamma 转录因子AP-2γ抗体2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙胺黄芪皂苷Ⅱ进口/国产SIRT1/sirtuin 1 沉默调节蛋白1抗体含量:HPLC≥98%
Human PITPNB ELISA KitP45017A1/Cytochrome P450 17A1 细胞色素C P450 17A1抗体2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙胺黄芪皂苷Ⅲ进口/国产Spindly/CCDC99 亚砷盐相关蛋白抗体含量:HPLC≥98%
Human PIGT ELISA KitTRPV2/VRL1 辣椒素受体样蛋白1抗体2,3,3-三甲基-3H-吲哚香酚进口/国产TBX-5 转录因子Tbx5抗体含量:HPLC≥99%
Human PIGS ELISA KitDICER1/Dicer 核糖核酸酶Dicer抗体2,3,3-三甲基-3H-吲哚黄杨(环维黄杨星D)进口/国产AAT/Tryptase α-1抗胰蛋白酶抗体含量:滴定法≥99%
Human PIGZ ELISA KitCullin 4B CUL4B蛋白抗体噻吩红景天苷进口/国产AATK AATK细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗体含量:HPLC≥98%
Human PIH1D1 ELISA KitTIAM1 T淋巴瘤侵袭转移诱导蛋白1抗体噻吩rosarin进口/国产NMP-22 核质蛋白22含量:HPLC≥98%
Human PIK3C2G ELISA KitSRD5A2 类固醇5α还原酶2抗体氯化钨(VI)络塞维进口/国产AATF 拮抗凋亡转录因子抗体含量:HPLC≥98%
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。