储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:基孔肯尼雅病毒PCR检测试剂盒
英文名称:Chikungunya Virus(CHIKV)RTPCR
编号: FSP1471
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PLK5丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶5抗体特价促销anti- Connexin-26 antibody石蜡切片组织βAMYLOID蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒低分子量蛋白7抗体
phospho-MST1R(Tyr1353) 磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体特价促销anti- Connexin-26 antibody载玻片细胞βAMYLOID蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒糖蛋白gp330抗体
MAPK13/SAPK4/p38delta丝裂原活化蛋白激酶13抗体特价促销anti- Connexin-26 antibody冰冻切片组织βAMYLOID蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒蛋白激酶LYK5抗体
Robo2轴突导向受体蛋白2抗体特价促销anti- Connexin-32 antibody石蜡切片组织βAMYLOID蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒肺腺瘤易感蛋白2抗体
SKARDNA聚合酶δ相互作用蛋白3抗体特价促销anti- Connexin-43 antibody细胞βAMYLOID蛋白表达比色法定量检测试剂盒磷酸化RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体
SRPK2丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SRPK2抗体特价促销anti- Connexin-46 antibody细胞βAMYLOID蛋白表达荧光定量检测试剂盒RNA聚合酶相关蛋白LEO1抗体
TBRG4转化生长因子β调节蛋白4抗体特价促销anti- Connexin-46 antibodyβAMYLOID蛋白表达西方杂交分析试剂盒磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体
TLK2丝氨酸/苏氨酸激酶TLK2抗体特价促销anti- COP1 antibodyβAMYLOID蛋白免疫共沉淀分析试剂盒磷酸化淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体
基孔肯尼雅病毒PCR检测试剂盒Human RGMA ELISA KitTP53I13 肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制基因)丁二酸酐30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5)
Human REX1 ELISA Kitp53 DINP1 p53诱导核蛋白1抗体(S)-6,6'-二溴-2,2'-双(甲氧基甲氧基)-1,1'-联萘酚0.1%吕氏碱性美蓝染色液
Human RERG ELISA Kitp73 alpha p53相关蛋白P73α抗体(S)-6,6'-二溴-2,2'-双(甲氧基甲氧基)-1,1'-联萘酚液体硫乙醇酸盐培养基管
Human REXO4 ELISA KitFrizzled 1/Wnt receptor Wnt信号受体蛋白抗体(S)-(+)-3-哌啶甲酸乙酯YPDA培养基
Human RFC2 ELISA KitGNAT3 G蛋白转录因子α3抗体(S)-(+)-3-哌啶甲酸乙酯改良MSRV培养基
Human REXO2 ELISA KitGPR124 G蛋白偶联受体124抗体(肿瘤血管内皮标记物)(S)-(+)-3-哌啶甲酸乙酯哥伦比亚血琼脂基础(改良)
Human RCBTB2 ELISA KitGPR172B G蛋白偶联受体172B抗体大豆异黄酮80%DTM添加剂1
Human Recoverin ELISA KitGNAQ/Gα q G蛋白α亚单位蛋白Q抗体(S)-(+)-(3,5-Dioxa-4-phosphacyclohepta[2,1-aDTM添加剂2
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。