杂交瘤细胞无血清培养基

杂交瘤细胞无血清培养基

【杂交瘤细胞无血清培养基   用途与描述】
1、杂交瘤细胞无血清培养基可用于小鼠杂交瘤细胞的培养。一般不需驯化，可直接转入杂交瘤细胞无血清培养基中。
2、杂交瘤细胞无血清培养基也可用于大鼠及仓鼠杂交瘤细胞培养，但一般需要驯化，方可适应无血清的培养环境。
3、杂交瘤细胞无血清培养基中蛋白含量低，有利于表达抗体的纯化。
4、杂交瘤细胞无血清培养基内毒素低于0.25EU/mL，减少了腹水条件下困难的内毒素去除操作。
5、三种适合不同生产用量的配套工艺（摇瓶、透气袋、生物反应器）

杂交瘤细胞是将免疫的小鼠脾淋巴细胞（B细胞）与小鼠骨髓瘤细胞融合在一起，该细胞既具备细胞能够产生特异性抗体的特性，又具备肿瘤细胞能够无限传代（永生性）的特点。因此通过杂交瘤细胞的不断传代，就会得到所需种类的单克隆抗体。

【杂交瘤细胞无血清培养基   规格与保存】

 在杂交瘤细胞株培养的后期添加杂交瘤培养基抗增剂，可以刺激单克隆抗体表达。

【杂交瘤细胞无血清培养基   主要成分】
杂交瘤细胞无血清培养基主要成分：氨基酸，无机盐，人白蛋白，转铁蛋白，胰岛素，微量元素等。

【杂交瘤细胞无血清培养基   实验数据】

一、杂交瘤细胞不同培养方式细胞数量与抗体产量对照表（1号细胞株）

静态培养条件：T25培养瓶，5mL培养基。细胞接种密度7.0x10⁴/mL。连续7天不换液培养。
摇瓶培养条件：125mL摇瓶，30mL培养基，转速90rpm。细胞接种密度7.0x10⁴/mL。连续7天不换液培养。

二、杂交瘤细胞不同培养方式细胞数量与抗体产量对照表（2号细胞株）

静态培养条件：T25培养瓶，5mL培养基。细胞接种密度4.0x10⁴/mL。连续7天不换液培养。
摇瓶培养条件：125mL摇瓶，30mL培养基，转速90rpm。细胞接种密度4.0x10⁴/mL。连续7天不换液培养。

三、三种适合不同生产用量的配套工艺（摇瓶、透气袋、生物反应器）的培养数据

1、培养瓶静态培养数据
1号细胞株


培养瓶静态培养条件：T25培养瓶，5mL培养基。细胞接种密度3.5x10⁵/mL。连续7天不换液培养。

培养瓶静态细胞峰值：1.282x10⁶/mL
培养瓶静态抗体峰值：329.5mg/L（检测方法：小鼠IgG  Elisa检测）

2号细胞株


培养瓶静态培养条件：T25培养瓶，5mL培养基。细胞接种密度2.6x10⁵/mL。连续7天不换液培养。

培养瓶静态细胞峰值：1.335x10⁶/mL
培养瓶静态抗体峰值：390mg/L（检测方法：小鼠IgG  Elisa检测）

2、摇瓶培养数据

1号细胞株


摇瓶培养条件：125mL摇瓶，30mL培养基，转速90rpm。细胞接种密度7x10⁴/mL。连续7天不换液培养。

摇瓶细胞峰值：2.185x10⁶/mL
摇瓶抗体峰值：510mg/L（检测方法：小鼠IgG  Elisa检测）

2号细胞株


摇瓶培养条件：125mL摇瓶，30mL培养基，转速90rpm。细胞接种密度4x10⁴/mL。连续7天不换液培养。

摇瓶细胞峰值：1.588x10⁶/mL
摇瓶抗体峰值：521mg/L（检测方法：小鼠IgG  Elisa检测）

3、2L培养袋培养数据（静态培养）
1号细胞株


培养袋静态培养条件：2L培养袋，1L培养基。接种密度3.4x10⁵/mL。连续9天根据密度补液培养。

培养袋细胞峰值：2.542x10⁶/mL
培养袋抗体峰值：480.3mg/L（检测方法：小鼠IgG  Elisa检测）

2号细胞株


培养袋静态培养条件：2L培养袋，1L培养基。接种密度2.0x10⁵/mL。连续9天根据密度补液培养。

培养袋细胞峰值：2.170x10⁶/mL
培养袋抗体峰值：522.5mg/L（检测方法：小鼠IgG  Elisa检测）

四、与现有国外品牌的部分对照数据

细胞密度方面：Yocon培养基最高细胞密度为1.282x106/mL，*****培养基最高细胞密度为1.370x106/mL。最高细胞密度确实差异不大。
细胞倍增时间方面：Yocon培养基第2天即达到了细胞密度峰值，*****培养基第3天达到细胞密度峰值。细胞倍增时间差异显著。

抗体表达方面：
1号细胞株。Yocon小鼠IgG抗体表达量峰值为329.5mg/L，相比*****的240.0mg/L。多出37%。差异明显。