磷酸化蛋白激酶B2抗体

Anti-phospho-AKT2 (Ser474)

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上海更新日期：2022-09-02

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产品详情:

中文名称：: 磷酸化蛋白激酶B2抗体

英文名称：: Anti-phospho-AKT2 (Ser474)

保存条件：: Store at -20 °C

纯度规格：: 1mg/1ml

产品类别：: 抗体一抗

抗体反应的因素：
1.电解质：抗原抗体特异结合后，胶体粒便可发生脱水作用，此时易受电解质影响，产品仅用于科研如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚，于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
磷酸化蛋白激酶B2抗体 别名 AKT2 (phospho S474); p-AKT2 (phospho S474); Akt2(Phospho-Ser474); C AKT; MGC9965; Oncogene AKT1; PKB; PRKBA; Protein Kinase B Alpha; RAC Alpha; RAC; RAC PK Alpha; RAC Serine/Threonine Protein Kinase; vAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1.

浓度 1mg/1ml

规格 0.1ml/100μg

抗体来源 Rabbit

克隆类型 polyclonal

交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

产品类型一抗磷酸化抗体
英文名称 Anti-phospho-AKT2 (Ser474)

中文名称 磷酸化蛋白激酶B2抗体

研究领域肿瘤免疫学神经生物学信号转导转录调节因子激酶和磷酸酶

蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa

性状 Lyophilized or Liquid

免疫原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human AKT2 around the phosphorylation site of Ser474

亚型 IgG

纯化方法 affinity purified by Protein A

储存液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复）
实验步骤：
1、石蜡切片，常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗，pbs 浸泡5 分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。
3、3%双氧水去离子水（无色液体）孵育15-20 分钟，以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20 分钟，倾去，勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
9、滴加试剂C（橙色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
11、显色剂显色（DAB 或AEC）
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要，可进行复染，脱水，透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
产品仅用于科研如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

抗体反应特点：
1.高度特异性，特异性是抗原抗体反应的最主要特征，特定抗原决定簇只与特定抗体结合；
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为：Ag+AbAg·Ab；
3.适当浓度和比例；
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
含试剂：
1、一抗（应用：IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ）
2、无色试剂：内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A：封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B：生物素标记二抗工作液：生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C：辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液（白色）20ml
AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA Kit≥160 CDU/mg,Sigma分装蛋白基因产物9.5试剂盒