大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒

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样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 产品仅用于科研标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗Bcl-2抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的Bcl-2会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GF-β1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗Bcl-2抗体与结合在包被抗体上的Bcl-2结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，Bcl-2浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中Bcl-2的浓度。
产品名称：大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒
英文名称：Rat B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 
规格：48T/96T
货号：A108483
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
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KH7 （50 mg）2-（1H-benzimidazol-2-ylthio）-2-[（5-bromo-2-hydroxyphenyl）methylene]hydrazide， propanoic acid； KH7

NAD+ （free acid） （1 g）Nicotinamide adenine dinucleotide； β-nicotinamide adenine dinucleotide hydrate

HEPES Stock Solution （1 M） （250 mL）HEPES Stock Solution （1 M）

Phosphatidic Acid Assay Standard （1 ea）Phosphatidic Acid Assay Standard

生物素标记磷化组蛋白H3S10多肽Biotinylated Phospho Histone Ser 10 Peptide （100 ul）

AZD 24614-[[4-fluoro-3-[（4-methoxy-1-pipeidinyl）carbonyl]phenyl]methyl]-1（2H）-Phthalazinone

Indomethacin heptyl ester （1 mg）1-（4-chlorobenzoyl）-5-methoxy-2-methyl-1H-indole-3-acetic acid， 1-heptyl ester； Indomethacin heptyl ester

Z-IETD-FMK， Caspase-8抑制剂（氟基）Z-IETD-FMK

LSD Peptide Substrate （1。2 mL）LSD Peptide Substrate

8-hydroxy Guanine （hydrochloride） （50 mg）2-amino-1H-purine-6，8-dione， monohydrochloride； 8-Oxoguanine|NSC 22728-hydroxy Guanine （hydrochloride）

（6R，7R）-3-[2-（2，4-dinitrophenyl）ethenyl]-8-oxo-7-[（2-thiophen-2-ylacetyl）amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acidNitrocefin

PtdIns-（3，4，5）-P3 （1-stearoyl， 2-docosahexaenoyl） （sodium salt） （50 ug）1-（1-octadecanoyl）-2R-（5Z，8Z，11Z，14Z）-eicosatetraenoylphosphatidyl）inositol-3，4，5-triphosphate， tetrasodium salt； PtdIns-（3，4，5）-P3 （1-stearoyl， 2-docosahexaenoyl） （sodium salt）

Oxy-16 （5 mg）cholest-5-ene-3b，20，22R-triol； 20（R），22（R）-dihydroxy Cholesterol； Oxy-16

8（9）-EET （100 ug）（±）8（9）-epoxy-5Z，11Z，14Z-eicosatrienoic acid； 8（9）-EpETrE； 8（9）-EET
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注意事项:
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。产品仅用于科研实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。