"HMCB Cells|人黑色素瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
BJA-B细胞系相关产品：Y3Ag1.2.3细胞、NE-1细胞、BC-020细胞
HSC（Human Schwann）细胞系相关产品：CCC-HHM-2细胞、SupB15W细胞、GM17219细胞
RPMI-2650细胞系相关产品：BC-021细胞、NHLF细胞、H-1648细胞
细胞生长：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
HMCB Cells|人黑色素瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
CL-34细胞系相关产品：MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
hEM15A细胞系相关产品：NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
SCC-9细胞系相关产品：Ls-174-T细胞、TU 686细胞、A2780/CP70细胞
T/GHA-VSMC细胞系相关产品：SGC-7901细胞、NCIH441细胞、KOSC2细胞
细胞传代方法：１：６—１：１０传代，２天换液１次
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２-５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２-３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HMCB Cells|人黑色素瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
Panc05.04细胞系相关产品：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞
G-Olig2细胞系相关产品：C3H10T1-2细胞、SNUC1细胞、Calu 6细胞
NCIH520细胞系相关产品：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
NCI-H524细胞系相关产品：DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
D341细胞系相关产品：hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞
SKRC-42细胞系相关产品：H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
HFL细胞系相关产品：HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞
SKNDZ细胞系相关产品：751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
Nb-2细胞系相关产品：C666-1细胞、SK MEL 5细胞、CL40细胞
SMA-560细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、801-D细胞、Tu-686细胞
3-LL细胞系相关产品：CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
Ramos-RA1细胞系相关产品：H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
HMCB Cells|人黑色素瘤细胞系
HRVEC细胞系相关产品：CCK-81细胞、COLO_320DM细胞、L-6细胞
C42细胞系相关产品：LUDLU-1细胞、1E8-H细胞、PLA 802细胞
T98G细胞系相关产品：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
SNGM细胞系相关产品：H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞
Dunn LM8细胞系相关产品：343MG细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞、BMSCs（mBMSCs）细胞
CAMA-1细胞系相关产品：Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞
253J B-V细胞系相关产品：MNNG/HOS Cl #5细胞、HEC-1A细胞、H838细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
Y1细胞系相关产品：CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
Normal fibroblast-10细胞系相关产品：58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
BA/F3细胞系相关产品：DSL-6A-C1细胞、HEP-3B2细胞、MDA-MB468细胞
CV-1 in Origin Simian-7细胞系相关产品：MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞
16HBE14o-细胞系相关产品：Panc 3.27细胞、SGC7901细胞、HeLa/S3细胞
Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
NCIH2066细胞系相关产品：CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
NCI-H661细胞系相关产品：MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
H1404细胞系相关产品：He-La细胞、Hs-343-T细胞、PT-67细胞
8226细胞系相关产品：HCT-15细胞、H-1930细胞、NCI H295R细胞
SK ES 01细胞系相关产品：MKN45细胞、PSN-1细胞、NCI-H1385细胞
CSQT-2细胞系相关产品：Blotchy fibroblast-11细胞、COR-L88细胞、BT-474细胞
Hs68细胞系相关产品：DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
KM.12细胞系相关产品：HFLS细胞、GM02131细胞、SK HEP 01细胞
L-5178-Y-R细胞系相关产品：WPE-int细胞、SW260细胞、OUMS23细胞
C33细胞系相关产品：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞
CL MC/9细胞系相关产品：HFL 1细胞、Walker256-TC细胞、NOR-10细胞
H716细胞系相关产品：Colo16细胞、BRL 3A细胞、NCI-H1666细胞
KRC-Y细胞系相关产品：Human Foreskin Fibroblast细胞、EAC细胞、Y3M细胞
TE-1细胞系相关产品：OC316细胞、Sf-21细胞、HCC-1395细胞
HD11细胞系相关产品：GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
SKHEP-1细胞系相关产品：SNT-8细胞、NCI-H1436细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞
MV 3细胞系相关产品：MDAMB361细胞、UCLA SO M21细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞
CCRF-SB细胞系相关产品：RT-BM 1细胞、NS1-1 Ag4.1细胞、C12细胞
A-431细胞系相关产品：RL95-2细胞、Raji细胞、SKBR-3细胞
MG-HU-3细胞系相关产品：TE-32细胞、CCD-1112sk细胞、LTEPa2细胞
KLM-1细胞系相关产品：RPE1细胞、KALS1细胞、MEL细胞
Hs940-T细胞系相关产品：NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞
NBL-3细胞系相关产品：RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞
AN-3细胞系相关产品：U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞
BNL CL2细胞系相关产品：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
HEL299细胞系相关产品：SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
GM2219C细胞系相关产品：AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
hTERT-RPE-1细胞系相关产品：SAS细胞、MASMC细胞、TE32细胞
H-69细胞系相关产品：VK2 (E6/E7)细胞、E304细胞、NCI-H1048细胞
NT-2细胞系相关产品：CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞
NCI-H727细胞系相关产品：T-ALL 1细胞、NCI-H1993细胞、KG-1细胞
Kit 225细胞系相关产品：NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞
HIMEC细胞系相关产品：NCI-157细胞、2V6.11细胞、SCL-2细胞
Y3M细胞系相关产品：HCCLM3细胞、DiFi细胞、DHL8细胞
TMD8细胞系相关产品：UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
HMCB Cells|人黑色素瘤细胞系
TE10细胞系相关产品：V-79-4细胞、NCI-H526细胞、Jurkat FHCRC细胞
NCIH727细胞系相关产品：NCI-N87细胞、NCI-H1882细胞、COV434细胞
HFLS细胞系相关产品：MPC11细胞、Panc05.04细胞、Panc813细胞
PC-3细胞系相关产品：LS180细胞、RC-2细胞、Jurkat E6-1细胞
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