"PSN1 Cells|人胰腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
H-1666细胞系相关产品:OCI-AML-2细胞、BE(2)M-17细胞、HCC1428细胞
NSC-34细胞系相关产品:CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞
TO 175.T细胞系相关产品:RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
细胞生长:贴壁
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
PSN1 Cells|人胰腺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
CC-LP-1细胞系相关产品:HCC-2279细胞、TE-11细胞、HEC1B细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品:YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
H2171细胞系相关产品:LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞
Eph4 1424细胞系相关产品:HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
细胞传代方法:1:2-1:6传代,2-3天换液1次。
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)红的作用是什么?红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PSN1 Cells|人胰腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
BEL-7404细胞系相关产品:CO115细胞、RPMI.8226细胞、High5细胞
OC 316细胞系相关产品:SF-539 BT细胞、Nittby-Salford 1细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞
EFO-27细胞系相关产品:PLA-802细胞、NCIH1092细胞、PNT1A细胞
SNU-5细胞系相关产品:SKLU01细胞、HCT_116细胞、KYSE-50细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
HCC-1359细胞系相关产品:SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
VCaP细胞系相关产品:Hs274T细胞、LNCaP-C4-2细胞、SKOV-3细胞
BC-027细胞系相关产品:MOVAS细胞、SW 620细胞、CT-26 WT细胞
HEP-3B2细胞系相关产品:CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
HASMC细胞系相关产品:HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞
EL 4细胞系相关产品:L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞
TCam 2细胞系相关产品:COLO-320-HSR细胞、OCI-Ly 7细胞、LNT-229细胞
NCI-H711细胞系相关产品:P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
PSN1 Cells|人胰腺癌细胞系
IOSE29细胞系相关产品:C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
P3J.HR1K细胞系相关产品:H-510A细胞、B16BL6细胞、SUSM1细胞
AtT20细胞系相关产品:U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞
SuDHL 4细胞系相关产品:Evsa T细胞、H-1876细胞、WTRL1细胞
HuLEC-5a细胞系相关产品:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
TGW-nu-1细胞系相关产品:Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞
OVCAR-4细胞系相关产品:WML2细胞、MBT2细胞、H-2591细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品:NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品:NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
SK-MEL5细胞系相关产品:HemECs细胞、HUT-28细胞、SW 403细胞
Hs819.T细胞系相关产品:SKO-007细胞、H-524细胞、NCIH2073细胞
SK MEL-28细胞系相关产品:Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞
NCI-H1838细胞系相关产品:A3细胞、Strain V细胞、B16细胞
NTC200细胞系相关产品:SUPB15细胞、SK-ES细胞、P815细胞
MDCK-2细胞系相关产品:Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞
SK-MEL24细胞系相关产品:IGROV 1细胞、EFM192B细胞、COLO-1细胞
OVCA432_Bast细胞系相关产品:NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞
HT1197细胞系相关产品:190PT细胞、MKN1细胞、A-375细胞
HBVSMC细胞系相关产品:CAL-27细胞、Kelly细胞、OCI AML4细胞
373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
Hs 578.T细胞系相关产品:OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
HT 1376细胞系相关产品:PG-4(S+L-)细胞、Panc-327细胞、NCIH1993细胞
NCIH187细胞系相关产品:J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞
HCC1143细胞系相关产品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、NL-20细胞、MDCK-II细胞
CL 1-0细胞系相关产品:HFT-8810细胞、U373-MG细胞、NCI-H292细胞
SK Col 1细胞系相关产品:KOSC-2细胞、NCIH2228细胞、NCI H929细胞
NCIH820细胞系相关产品:HBE细胞、SNU-668细胞、SKBr3细胞
FU-97细胞系相关产品:NCl-H157细胞、MAD109细胞、Hs819T细胞
MRMT-1细胞系相关产品:HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品:ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
Vero C1008细胞系相关产品:COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
L-6 myoblast细胞系相关产品:P30-OHKUBO细胞、SKCO-1细胞、TALL-104细胞
HBSMC细胞系相关产品:Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞
SNU449细胞系相关产品:BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞
RPMI 8226细胞系相关产品:LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞
MEL-526细胞系相关产品:Tj-905细胞、HEK 293-H细胞、WILL2细胞
OCILY10细胞系相关产品:HLF-a细胞、RSMC细胞、C3H10T1/2 clone8细胞
PC-12细胞系相关产品:SW-13细胞、P3X63NS1细胞、KM933细胞
HEL-92细胞系相关产品:Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
Panc 5.04细胞系相关产品:WBF344细胞、CA-OV-3细胞、MESSA Dx5细胞
IPAM-WT细胞系相关产品:Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞
CWR22R-V1细胞系相关产品:HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞
Onda 11细胞系相关产品:SK-N-BE(2)C细胞、GM02219D细胞、COLO206细胞
MB231细胞系相关产品:MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞
OCLY8细胞系相关产品:PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞
CAMA-1细胞系相关产品:Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞
H64细胞系相关产品:EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
HM细胞系相关产品:HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞
SCL-1细胞系相关产品:MDA-MB-175-VII细胞、SO-RB50细胞、NCI-H1581细胞
MALME 3M细胞系相关产品:A204细胞、HaCaT细胞、MDCK II细胞
RPMI 6666细胞系相关产品:TOV-112细胞、Fetal Human Colon细胞、NCI-H1437细胞
PSN1 Cells|人胰腺癌细胞系
A 2058细胞系相关产品:SK-N-BE2C细胞、JIMT1细胞、KYSE50细胞
SF-295细胞系相关产品:HSMC细胞、A-172 MG细胞、IOSE-Mar细胞
BC-027细胞系相关产品:MOVAS细胞、LI7细胞、H1048细胞
DHL-2细胞系相关产品:DU145细胞、MB157细胞、NS1-Ag4细胞
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