"NCI-H650 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
HT(H9)细胞系相关产品:Jurkat E6-1细胞、PLA-801C细胞、CG-4细胞
TE4细胞系相关产品:RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
Dami细胞系相关产品:H-1954细胞、SK-NMC细胞、U-138MG细胞
细胞生长:贴壁
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
NCI-H650 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Hs 578.T细胞系相关产品:OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞
H211细胞系相关产品:UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞
T98 G细胞系相关产品:Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
Y1细胞系相关产品:CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
细胞传代方法:1:3-1:6传代;
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。传代细胞培养操作步骤:1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H650 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
TE8细胞系相关产品:RASMC细胞、NKM-1细胞、PLA-801D细胞
COLO 824细胞系相关产品:KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞
CEM-C7细胞系相关产品:CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
EOMA细胞系相关产品:P3/NSI/1-AG4-1细胞、OB2细胞、H-548细胞
细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
COV434细胞系相关产品:SRS-82细胞、NWA细胞、FL83B细胞
373MG细胞系相关产品:624 MEL细胞、ARPE19细胞、HMEL细胞
A 375细胞系相关产品:Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞
SMMC7721细胞系相关产品:CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
F-81细胞系相关产品:BIC细胞、WM266细胞、X63细胞
HCC-366细胞系相关产品:NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
MES-SA细胞系相关产品:MCF-12A细胞、SUNE 1细胞、6-10B细胞
alphaTC clone 6细胞系相关产品:L细胞、PK(15)细胞、Hs 683.T细胞
NCI-H650 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
MFD-1细胞系相关产品:LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞
CL1-5细胞系相关产品:HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
H-889细胞系相关产品:NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞
SNU668细胞系相关产品:Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
MGC803细胞系相关产品:A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞
RPMI-1846细胞系相关产品:Hs940.T细胞、NCI-HUT-125细胞、HUASMC细胞
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
HSF细胞系相关产品:C3H10T1/2 clone8细胞、MGECs细胞、NCIH2106细胞
HSF细胞系相关产品:C3H10T1/2 clone8细胞、MGECs细胞、NCIH2106细胞
HEL 299细胞系相关产品:H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
NCI-H209细胞系相关产品:RA.1细胞、H1693细胞、KBM-7细胞
AGS细胞系相关产品:Glioma 261细胞、B 95.8细胞、H-596细胞
HCC0044细胞系相关产品:C-4 I细胞、Hs 852.T细胞、VERO76细胞
L cell line细胞系相关产品:IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞
NCIH1155细胞系相关产品:LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
CHP-212细胞系相关产品:RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
PL12细胞系相关产品:16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
Panc_03_27细胞系相关产品:A2780/Taxol细胞、Strain KB细胞、GP293细胞
SK HEP 01细胞系相关产品:HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
CTLL2细胞系相关产品:HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞
DLD1细胞系相关产品:AgC11x3A细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、Mahlavu细胞
IGROV 1细胞系相关产品:HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
MRC-V细胞系相关产品:Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
H-1915细胞系相关产品:S180细胞、NPC-TW039细胞、Pt-K2细胞
MDA-MB-468-RED细胞系相关产品:GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞
SU8686细胞系相关产品:BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞
HMO6细胞系相关产品:NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
293c18细胞系相关产品:NCIH23细胞、UO31细胞、BC-023细胞
MHCC-97细胞系相关产品:U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
beta-TC6细胞系相关产品:BCPAP细胞、TE3细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞
H1385细胞系相关产品:MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
MCF10-A细胞系相关产品:ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
H-660细胞系相关产品:P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
A2780CP70细胞系相关产品:P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞
NCIH1568细胞系相关产品:THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
NCIH1568细胞系相关产品:THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
Mono Mac6细胞系相关产品:138 MG细胞、KATOIII细胞、SCC-9细胞
HCe-8693细胞系相关产品:MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞
HCASMC细胞系相关产品:NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
Human Embryonic Kidney 293细胞系相关产品:My-La 2059细胞、NKL细胞、NKL细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品:GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
KP-N-RT-BM-1细胞系相关产品:OCIAML3细胞、KAT5细胞、578T细胞
H711细胞系相关产品:IMCD-3细胞、SW 982细胞、MGHU3细胞
Ramos(RA1)细胞系相关产品:IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
OCILY3细胞系相关产品:Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
D341细胞系相关产品:hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞
CA922细胞系相关产品:MOLT4细胞、Mv.1.Lu细胞、SK-N-SH细胞
2V6.11细胞系相关产品:IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
CF PAC-1细胞系相关产品:WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞
NCI-H650 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
CAKI 1细胞系相关产品:OCI Ly10细胞、Microbiological Associates-104细胞、HuTu 80细胞
SNUC2A细胞系相关产品:A 549细胞、OsACL细胞、Panc-1-P细胞
A 375细胞系相关产品:Hs 746T细胞、SN4741细胞、KBM-7细胞
LTEP a2细胞系相关产品:RSC-364细胞、PLA-801D细胞、D-283 Med细胞
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