"NCI-H2228 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
Mouse podocyte细胞系相关产品：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
YD-15细胞系相关产品：Ketr3细胞、NSC34细胞、Panc-10.05细胞
A549 ATCC细胞系相关产品：ECC1细胞、NCI-H2023细胞、NCIH2122细胞
细胞生长：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
NCI-H2228 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
NCIH1838细胞系相关产品：High Five细胞、A-20细胞、RMS 1598细胞
KTCTL140细胞系相关产品：H-2009细胞、Evsa-T细胞、COLO 678细胞
RASMC细胞系相关产品：OCI-Ly8细胞、TPC-1细胞、WSU-DLCL-2细胞
WI 38细胞系相关产品：GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代，每周２-３次。
传代细胞培养注意事项：１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤：瘤细胞悬液接种１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml/部位，＞１０(６)细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种：将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下：１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１×１０(６)腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７-１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H2228 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
Rat Fetal Lung-6细胞系相关产品：JB6 [Mouse]细胞、HUV-EC-C细胞、SK-MEL-2细胞
U251细胞系相关产品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞
H1954细胞系相关产品：Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
IMR 90细胞系相关产品：SNU-398细胞、SCLC-21H细胞、Sp2/mIL-6细胞
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
KNS-42细胞系相关产品：P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞
FL62891细胞系相关产品：PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
HCE-2 [50.B1]细胞系相关产品：G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
SKMEL2细胞系相关产品：Tca-83细胞、SW1353细胞、GM04679细胞
H-1373细胞系相关产品：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞
Y-79细胞系相关产品：MBT2细胞、DITNC1细胞、CX-1细胞
Anip[973]细胞系相关产品：B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
Ramos.G6.C10细胞系相关产品：MC-3T3细胞、ONS-76细胞、HUC细胞
NCI-H2228 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
MSTO-211 H细胞系相关产品：H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
SHSY-5Y细胞系相关产品：HEL-1细胞、SKLMS-1细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞
RMa-bm细胞系相关产品：CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞
SEG-1细胞系相关产品：H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
CV-1 in Origin Simian-1细胞系相关产品：H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞
NCI-H1436细胞系相关产品：LNCaP FGC细胞、V79细胞、H2087细胞
BNCL-2细胞系相关产品：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞
H-508细胞系相关产品：LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞
H-508细胞系相关产品：LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞
D-324MED细胞系相关产品：SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
Mouse Podocyte Clone-5细胞系相关产品：DSL-6A/C1细胞、HCEC-12细胞、U-251细胞
UM-UC-14细胞系相关产品：CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞
NCI-H1417细胞系相关产品：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞
HL-7702细胞系相关产品：Ly3细胞、H508细胞、BPH1细胞
293 Ad5细胞系相关产品：MO59J细胞、639V细胞、NCIADR.RES细胞
KM12-SM细胞系相关产品：143B TK-细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞、HLFa细胞
A-253细胞系相关产品：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
University of Arizona Cell Culture-893细胞系相关产品：GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞
SF-539 BT细胞系相关产品：SCL1细胞、Liver-02细胞、RMC细胞
G-401细胞系相关产品：NCIH889细胞、OC316细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞
NCI-H2171细胞系相关产品：AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
A431细胞系相关产品：HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞
HCEC细胞系相关产品：HARAB细胞、VSC4.1细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞
PL45细胞系相关产品：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞
GM02132细胞系相关产品：SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
RT4-D6-P2T细胞系相关产品：CAKI.1细胞、H-2196细胞、AR-42J细胞
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞
SCC7细胞系相关产品：Douglas Foster-1细胞、ASH3细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞
Det. 562细胞系相关产品：H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞
451Lu细胞系相关产品：NS1-1 Ag4.1细胞、RPMI No. 1846细胞、HCa/16A3-F细胞
CHP-212细胞系相关产品：RGM-1细胞、NCl-H157细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
McArdle RH-7777细胞系相关产品：WB F344细胞、786.O细胞、OVCAR-420细胞
WM115细胞系相关产品：NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞
GNM细胞系相关产品：SW579细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、SK.MEL.5细胞
KMH2细胞系相关产品：SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞
NCI-H292细胞系相关产品：FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞
HKF细胞系相关产品：H-157细胞、OV1063细胞、NCIH520细胞
P388D1细胞系相关产品：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞
Panc05.04细胞系相关产品：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞
PAMC82细胞系相关产品：mousepodocyte细胞、RIN14B细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞
P3HR1细胞系相关产品：SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
OVCAR3细胞系相关产品：BLO-11细胞、SNB.19细胞、NCI-H711细胞
NCI-H1299细胞系相关产品：COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
UMR 106细胞系相关产品：SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞
32D clone3细胞系相关产品：A9细胞、4T1-A细胞、PANC-02-03细胞
Li-7细胞系相关产品：NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞
SUM149-PT细胞系相关产品：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
B16/F0细胞系相关产品：P3/ag细胞、SW-839细胞、ATN1细胞
ISHI细胞系相关产品：SF17细胞、MC-26细胞、NCI-SNU-387细胞
SNU886细胞系相关产品：Huh 7.5细胞、SNU-719细胞、Hu-P-T3细胞
NCI-H2228 Cells|人非小细胞肺癌细胞系
PL-11细胞系相关产品：PA1细胞、YH-13细胞、A549细胞
b.End3细胞系相关产品：Calu 6细胞、SNUC1细胞、Psi2 DAP细胞
HCCLM6细胞系相关产品：LM3细胞、INS1E细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
MPP 89细胞系相关产品：QSG-7701细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、A-375.S2细胞
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