"NCI-H2085 Cells|人肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
MIA-PaCa-2细胞系相关产品:Dakiki细胞、HSC3细胞、HCPEpiC细胞
HT1080细胞系相关产品:PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞
MPVECs细胞系相关产品:WM 239A细胞、PL-9细胞、Hs819.T细胞
细胞生长:贴壁
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
NCI-H2085 Cells|人肺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
H-596细胞系相关产品:H-661细胞、CAL62细胞、Tb1Lu细胞
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品:MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞
Human Embryonic Skin细胞系相关产品:BeWo细胞、UMUC3细胞、SUDHL1细胞
BC-021细胞系相关产品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞
细胞传代方法:1:3-1:6传代
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H2085 Cells|人肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
L-6TG细胞系相关产品:P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞
ID8/MOSEC细胞系相关产品:QGP1细胞、NCIN87细胞、ADR-RES细胞
COLO 201细胞系相关产品:Madin Darby Canine Kidney细胞、HuP-T3细胞、Bovine Turbinate细胞
HIT细胞系相关产品:SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
MOLT4细胞系相关产品:HME-1细胞、VeroE6细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞
Ra No. 1细胞系相关产品:Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品:NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞
SNT8细胞系相关产品:CCD33Co细胞、OCI-LY-10细胞、HP615细胞
SF767细胞系相关产品:A2780CP70细胞、TE14细胞、KE 37细胞
WTRL1细胞系相关产品:AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
GOS-3细胞系相关产品:SW-837细胞、8305C_1细胞、OV-90细胞
P31/Fujioka细胞系相关产品:B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
NCI-H2085 Cells|人肺癌细胞系
CAOV3细胞系相关产品:CEL细胞、ACHN细胞、B16-F1细胞
CAL-39细胞系相关产品:B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
HOS(TE85)细胞系相关产品:HAVSMC细胞、NCI-841细胞、NCIH2347细胞
OP9细胞系相关产品:SNU354细胞、P3X63 Ag8细胞、HCC-1187细胞
NCI-H2023细胞系相关产品:G-292细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HOS (TE85)细胞
JurkatE6-1细胞系相关产品:Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞系相关产品:LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
CTLA4Ig-24细胞系相关产品:HEK293-H细胞、NCTC-929细胞、A2008细胞
CTLA4Ig-24细胞系相关产品:HEK293-H细胞、NCTC-929细胞、A2008细胞
TCam-2细胞系相关产品:SKMES-1细胞、NB-9细胞、HFF细胞
HBdSMC细胞系相关产品:SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
COV 504细胞系相关产品:HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
CCD 841 CoTr细胞系相关产品:COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞
SGC-7901细胞系相关产品:NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞
RAW264.7细胞系相关产品:SK MEL 5细胞、U-266细胞、Panc02-H0细胞
MES-SA-Dx5细胞系相关产品:CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞
QG-56细胞系相关产品:SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
GM04680细胞系相关产品:PL11细胞、KYSE270细胞、WSU-HN13细胞
A2780CP70细胞系相关产品:P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞
CF PAC-1细胞系相关产品:WSU-DLCL(2)细胞、NCI-H841细胞、TE12细胞
H-441细胞系相关产品:769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞
LNCaP细胞系相关产品:Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞
S3-HeLa细胞系相关产品:Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞
SN12PM6细胞系相关产品:COLO679细胞、HeLa细胞、KYSE180细胞
JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
CTX TNA2细胞系相关产品:JB-6 Cl 30细胞、USMC细胞、C-32细胞
H460细胞系相关产品:Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞
TOV-112D细胞系相关产品:ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
H1581细胞系相关产品:HSC-6细胞、L 132细胞、SPDC-CCL141细胞
RS1细胞系相关产品:HT 144细胞、MSTO-211细胞、Namalwa细胞
MS1细胞系相关产品:H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
Hepatoma 22细胞系相关产品:GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞
NCI-BL2141细胞系相关产品:UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞
TMK-1细胞系相关产品:MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞
SK Mel 2细胞系相关产品:VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞
A10细胞系相关产品:SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞
T98 G细胞系相关产品:Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
H820细胞系相关产品:CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞
JHH-7细胞系相关产品:GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞
SNU-520细胞系相关产品:H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
IOSE-80细胞系相关产品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、LO2细胞、H1781细胞
KOSC-2细胞系相关产品:OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
N-2a细胞系相关产品:SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
Hs 578T细胞系相关产品:SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞
MDA-MB 361细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
SKBR-3细胞系相关产品:RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
LN-229细胞系相关产品:RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
AM细胞系相关产品:HFLS-RA细胞、GLC-15细胞、HO1N1细胞
CAL-120细胞系相关产品:Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞
NCI-SNU-216细胞系相关产品:KPL4细胞、ANA-1细胞、H4-II-EC3细胞
HOP-62细胞系相关产品:LK2细胞、HUTU80细胞、T24细胞
NCI-H2085 Cells|人肺癌细胞系
EU-4细胞系相关产品:FUOV1细胞、Jurkat FHCRC细胞、HGSMC细胞
KYSE-30细胞系相关产品:95-D细胞、NIH-3T3-L1细胞、K1735细胞
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品:NRCC细胞、108CC15细胞、PF382细胞
OVCAR-4细胞系相关产品:C-Lu-65细胞、U-373-MG细胞、SKMES1细胞
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