"NCI-H2286 Cells|人肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
NCI-H446细胞系相关产品:WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞
KNS-62细胞系相关产品:UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞
JB-6 Cl 30细胞系相关产品:U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞
细胞生长:贴壁
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
NCI-H2286 Cells|人肺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、LS 180细胞、FRTL5细胞
NCI-H676细胞系相关产品:SKN-SH细胞、OCILY-3细胞、BC-027细胞
AMO1细胞系相关产品:RKO-AS-45-1细胞、MHCC 97-L细胞、OPM2细胞
细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
几种实验室细胞培养基成分的作用:1)NaHCO3的作用是什么?与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定;2)酸钠的作用是什么?酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM;3)加入HEPES有何好处?培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐,它可提供营养,但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer,加入HEPES能使细胞培养基在PH7.2-7.6条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM,即5ml 1M的Hepes加入到200ml完全培养基中;4)红的作用是什么?红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色;5)谷酰胺的作用是什么?几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H2286 Cells|人肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
HCC1428细胞系相关产品:P-388细胞、CTLL-2细胞、NR8383.1细胞
P3 (Jiyoye)细胞系相关产品:hMSC-BM细胞、CCD-1095Sk细胞、B-95-8细胞
U373MG细胞系相关产品:TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
Hs 888.T细胞系相关产品:SPDC-CCL141细胞、LC-MS细胞、TCC-PAN2细胞
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
Panc203细胞系相关产品:SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞
KATO III细胞系相关产品:MES 23.5细胞、PLC8024细胞、TGW-I-nu细胞
P3J细胞系相关产品:SW48细胞、P3-x63-Ag8 653细胞、CHOK1细胞
207细胞系相关产品:CHOS细胞、Panc-03.27细胞、HEC1-A细胞
H-1836细胞系相关产品:Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞
KU-812-F细胞系相关产品:SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞
LCMS细胞系相关产品:KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞系相关产品:293GP细胞、KY70细胞、CHO-ori细胞
NCI-H2286 Cells|人肺癌细胞系
Neuro-2a细胞系相关产品:HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞
SPC-A-1细胞系相关产品:CEM.C1细胞、BC-024细胞、751细胞
SPC-A1细胞系相关产品:H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞
DF-1细胞系相关产品:H1184细胞、UPCI:SCC090细胞、NCIH727细胞
NIH/3T3细胞系相关产品:MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
RPE-hTERT细胞系相关产品:alpha TC1.6细胞、NTERA2细胞、D-283MED细胞
KYSE450细胞系相关产品:NALM 6细胞、HEK293FT细胞、KMBC细胞
UCLA-SO-M21细胞系相关产品:NK92MI细胞、STO细胞、MV-3细胞
UCLA-SO-M21细胞系相关产品:NK92MI细胞、STO细胞、MV-3细胞
U118细胞系相关产品:HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
SW-48细胞系相关产品:COLO 16细胞、H-2030细胞、B16 F1细胞
NCI-H23细胞系相关产品:HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
COLO-738细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞
4T1细胞系相关产品:BSC40细胞、T173细胞、SK_HEP1细胞
RKO-AS45-1细胞系相关产品:HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
GM-346细胞系相关产品:OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞
BJA-B1细胞系相关产品:Me Wo细胞、Granta 519细胞、TR146细胞
PC3M-IE8细胞系相关产品:NWA细胞、SW-1417细胞、X63.Ag8.653细胞
Nakata-1细胞系相关产品:H2172细胞、JVM-2细胞、NCIADRRES细胞
NIH 3T6细胞系相关产品:CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
YH细胞系相关产品:NL-20细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、NCIH596细胞
MOLT-3细胞系相关产品:HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
OV-CA 432细胞系相关产品:KLM-1细胞、CV-1 in Origin Simian-1细胞、OP-9细胞
Granta519细胞系相关产品:TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞
Tca8113细胞系相关产品:Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞
Human Embryonic Skin细胞系相关产品:BeWo细胞、UMUC3细胞、SUDHL1细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品:P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
SK-ES细胞系相关产品:LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞
HEK293-EBNA1细胞系相关产品:16HBE细胞、M21细胞、IPECJ2细胞
SK-N-MC细胞系相关产品:Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
32D CL3细胞系相关产品:NCI-H87细胞、Colo-201细胞、DAKIKI Clone 1细胞
no.11细胞系相关产品:HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞
SNGM细胞系相关产品:H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞
Panc327细胞系相关产品:KPL-1细胞、BEL-7402细胞、COLO-320HSR细胞
Ramos-RA1细胞系相关产品:H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
Calu 3细胞系相关产品:MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
Molm14细胞系相关产品:CAL78细胞、HCE-2 [50.B1]细胞、HS 445T细胞
HCE-T细胞系相关产品:Panc-8_13细胞、CBRH-7919细胞、HTh-74细胞
HEL 299细胞系相关产品:H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
Hs 888.Lu细胞系相关产品:HT细胞、PL12细胞、P3J细胞
CMT-93细胞系相关产品:Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
HCT116/L细胞系相关产品:PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞
MSF细胞系相关产品:H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞
AU-565细胞系相关产品:LCLC-103H细胞、Clone 166细胞、Panc04.03细胞
Caco2-BBE细胞系相关产品:Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
SU-DHL-8细胞系相关产品:CII细胞、HMrSV5细胞、MCA38细胞
Hep 3B2细胞系相关产品:JKT-1细胞、CCD-841-CoN细胞、769-P细胞
NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞
KM932细胞系相关产品:T-24细胞、Caco-2细胞、HRC-99细胞
H1838细胞系相关产品:DCS细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDAMB157细胞
CAL 39细胞系相关产品:MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
NCI-H2286 Cells|人肺癌细胞系
RK13细胞系相关产品:CCLP1细胞、H1666_DA细胞、EFO27细胞
OVCAR-433细胞系相关产品:MDA-MB-435 S细胞、LC1-Sq细胞、OVCA-433细胞
P3J细胞系相关产品:SW48细胞、MGHU3细胞、LTEPa2细胞
HCC366细胞系相关产品:MUM2B细胞、Hs 746T细胞、Panc04.03细胞
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