"Calu-6 Cells|人肺退行性癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
KMST-6细胞系相关产品：DF-1细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、NCIH441细胞
ESC细胞系相关产品：Y-79细胞、HS-294T细胞、HCe-8693细胞
COLO 320F细胞系相关产品：G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
细胞生长：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
Calu-6 Cells|人肺退行性癌细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
SW1271细胞系相关产品：BT325细胞、P3X63 AG8-653细胞、3T3L1细胞
Natural Killer-92细胞系相关产品：BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞
COLO 320HSR细胞系相关产品：A 72细胞、OV90细胞、HHL-5细胞
PC-3M-1E8细胞系相关产品：OVCAR-4细胞、ARH 77细胞、QBI-293A细胞
细胞传代方法：消化２０分钟。１：２。５-６天长满。
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Calu-6 Cells|人肺退行性癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
NCI-H1623细胞系相关产品：COLO 320HSR细胞、HHUA细胞、ST486细胞
HSC-2细胞系相关产品：Hs-578-T细胞、EPC细胞、MPC-11细胞
Mo 59J细胞系相关产品：GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品：DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
MT4细胞系相关产品：B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞
T47D细胞系相关产品：AR-42J细胞、Hs895T细胞、Hs888T细胞
HLE B-3细胞系相关产品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞
SR细胞系相关产品：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞
Hs 274.T细胞系相关产品：KU.812细胞、HECV细胞、NCIH23细胞
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
SUDHL4细胞系相关产品：3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞
Calu-6 Cells|人肺退行性癌细胞系
H2085细胞系相关产品：Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
SF295细胞系相关产品：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞
Hs832.Tc细胞系相关产品：Vero 76细胞、MDAMB231细胞、NCI-A549细胞
SUDHL-10细胞系相关产品：MDCC-MSB-1细胞、HPAC细胞、MDA-MB415细胞
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
PC-3M IE8细胞系相关产品：Vertebral Cancer of the Prostate细胞、MRC-V细胞、AML-12细胞
A375细胞系相关产品：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞
As-PC1细胞系相关产品：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
As-PC1细胞系相关产品：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞
SK.MEL.5细胞系相关产品：Co 115细胞、HCT.116细胞、PLA801C细胞
L132细胞系相关产品：SW 579细胞、UCLA SO M14细胞、SK-LMS-1细胞
H9细胞系相关产品：8402细胞、TE-10细胞、HEK 293细胞
DU 4475细胞系相关产品：WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞
RMG1细胞系相关产品：MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
KYSE-30细胞系相关产品：95-D细胞、NCTC929细胞、3T3 L1细胞
hEEC细胞系相关产品：Pa017C细胞、A-2780细胞、MM.1S细胞
CMT64细胞系相关产品：LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
PC 61细胞系相关产品：CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
HCC366细胞系相关产品：L-363细胞、KYSE70细胞、GM00637H细胞
SKNO1细胞系相关产品：MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞
COLO-16细胞系相关产品：OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞
L-363细胞系相关产品：H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
NCI-H69C细胞系相关产品：SK.MEL.28细胞、KNS42细胞、HEK;293细胞
HS-683细胞系相关产品：HTori3细胞、OK-WT细胞、HCC 38细胞
MC38细胞系相关产品：QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
RPMI-2650细胞系相关产品：BC-021细胞、NHLF细胞、H-1648细胞
NCI H226细胞系相关产品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
PE CA PJ34细胞系相关产品：H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
WEHI164细胞系相关产品：RMS 13细胞、BL2141细胞、HCC0202细胞
HCC1833细胞系相关产品：HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞
EFM-192A细胞系相关产品：H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞
VK2细胞系相关产品：COR-L26细胞、H2170细胞、H2171细胞
H-2330细胞系相关产品：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
HR-1细胞系相关产品：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
SN12CPM6细胞系相关产品：SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
SN12CPM6细胞系相关产品：SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
Ketr3细胞系相关产品：HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
ZR7530细胞系相关产品：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
HEL 299细胞系相关产品：H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
WILL-2细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞
NU-GC-2细胞系相关产品：NCI-460细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞
GM3569细胞系相关产品：P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDA-MB361细胞、KNS-81细胞
CEM-0细胞系相关产品：33604细胞、NCIH1341细胞、NB1-RGB细胞
Co 205细胞系相关产品：Hs1.Tes细胞、KNS81细胞、KYSE 270细胞
H747细胞系相关产品：SUD-4细胞、MDA MB 231细胞、SUM-52PE细胞
NCIH226细胞系相关产品：H-524细胞、LTPA细胞、COLO320DM细胞
SUM149PT细胞系相关产品：HCC1954细胞、hTERT RPE1细胞、HEK293-F细胞
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
hFOB细胞系相关产品：H.Ep. No. 2细胞、NCI-446细胞、COV 504细胞
Calu-6 Cells|人肺退行性癌细胞系
Human Epithelioma-2细胞系相关产品：HCC-1171细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞、LNCaP-C4-2细胞
P 815细胞系相关产品：SPCA1细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SW 948细胞
HLCL9B10细胞系相关产品：HCC1599细胞、H-838细胞、PT67细胞
Rat-1细胞系相关产品：T-HSC细胞、HOP62细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
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