"A-704 Cells|人肾癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
OVCA8细胞系相关产品:GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞
Walker256细胞系相关产品:NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
End1/E6E7细胞系相关产品:Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
细胞生长:贴壁
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。纯水系统:细胞培养用水一般要求双蒸水,实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材:细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
A-704 Cells|人肾癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
ATDC5细胞系相关产品:L23/P细胞、RGC-6细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞
MCF10-A细胞系相关产品:ME-1 [Human leukemia]细胞、SNU387细胞、SNU251细胞
NCI-HUT-460细胞系相关产品:TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞
BAC1.2F5细胞系相关产品:LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
细胞传代方法:1:3—1:4传代,每周换液2-3次
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
A-704 Cells|人肾癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
HuH-1细胞系相关产品:NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
J-774A.1细胞系相关产品:CEM-CCRF细胞、OCI-Ly 19细胞、PC12(高分化)细胞
JTC-28细胞系相关产品:G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
RPMI No. 1846细胞系相关产品:NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
MFM223细胞系相关产品:TMD8细胞、Hepatoma 22细胞、P3J-HR-1细胞
T-24细胞系相关产品:SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
H-23细胞系相关产品:L 363细胞、SK-N-BE(2C)细胞、NCI-H187细胞
C-127细胞系相关产品:McARH7777细胞、TOV112细胞、BPH-1细胞
NT2-D1细胞系相关产品:Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞
RPE-hTERT细胞系相关产品:alpha TC1.6细胞、NTERA2细胞、D-283MED细胞
RIN14B细胞系相关产品:CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
293 c18细胞系相关产品:NCI-SNU-668细胞、HPAF-I细胞、A431/P细胞
A-704 Cells|人肾癌细胞系
H-2126细胞系相关产品:A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞
U118细胞系相关产品:HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
SRA01/04 (HLE)细胞系相关产品:AMO-1细胞、SBC3细胞、3-LL细胞
KCL22S细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
Giant Cell Tumor细胞系相关产品:L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品:MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞
NIH:OVCAR3细胞系相关产品:NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
H-889细胞系相关产品:NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞
Case 3细胞系相关产品:NCIH2106细胞、BGC823细胞、H1666细胞
GC-1细胞系相关产品:Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞
Bovine ENDometrial cells细胞系相关产品:N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
SW620细胞系相关产品:Granta 519细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、Vero-76细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
D341MD细胞系相关产品:SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
hTERT-HME-1细胞系相关产品:293-EBNA细胞、HGF-1细胞、KOPN-8细胞
KBM5细胞系相关产品:KMM-1细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、NW38细胞
THLE-2细胞系相关产品:TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
H847细胞系相关产品:FRO细胞、Huh 7.5.1细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞
CCD-841CoN细胞系相关产品:HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞
H-211细胞系相关产品:SUM 190细胞、HT1197细胞、CEM C7细胞
CAL12T细胞系相关产品:L6细胞、SEG1细胞、NCI H747细胞
HCC1359细胞系相关产品:SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞
NCIH1436细胞系相关产品:RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞
L6细胞系相关产品:SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞
JKT1细胞系相关产品:Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞
H1836细胞系相关产品:H-1581细胞、MUGCHOR1细胞、GM00215A细胞
GBC-SD细胞系相关产品:Alexander细胞、Hx-147细胞、PL5细胞
IOSE80UBC细胞系相关产品:HBL1细胞、SW 962细胞、NCIH2141细胞
MDA-468细胞系相关产品:HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞
B16-BL6细胞系相关产品:C6661细胞、COLO 357细胞、HLEC-B3细胞
IPLB-SF 21AE细胞系相关产品:SKO3细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、HCC-2108细胞
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品:Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
NCIH526细胞系相关产品:Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞
H2342细胞系相关产品:HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞
HCC0827细胞系相关产品:RPMI-8402细胞、3 LL细胞、IBRS-2细胞
Hs-27细胞系相关产品:SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
Hs-688A-T细胞系相关产品:LNCaP.FGC细胞、ANA1细胞、HTR-8/SV-neo细胞
UMC-11细胞系相关产品:Human Embryo Kidney-2细胞、TSCCa细胞、SNU-620细胞
ASPC1细胞系相关产品:HT-144细胞、TE671/RD细胞、MFM223细胞
TE7细胞系相关产品:NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
Laboratory of Allergic Diseases 2细胞系相关产品:SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞系相关产品:H-1623细胞、H-719细胞、OVSAHO细胞
MDCK细胞系相关产品:SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
Ca 9-22细胞系相关产品:Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
NRK52E细胞系相关产品:HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞
NBLS细胞系相关产品:CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞
Caco-2 BBe细胞系相关产品:RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
H2347细胞系相关产品:ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞
NTERA-2细胞系相关产品:TCMK1细胞、FD-LSC-1细胞、NCI-H378细胞
A-704 Cells|人肾癌细胞系
Potorous tridactylus Kidney 1细胞系相关产品:Caco-2BBe细胞、NCIH2141细胞、Sol8细胞
2008细胞系相关产品:T241细胞、SGC-7901/DDP细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞
H23细胞系相关产品:EC-GI细胞、Scott细胞、H1693细胞
LAN1细胞系相关产品:BHK21细胞、Natural Killer-92细胞、NTHY-ORI3.1细胞
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