"DoTc2 4510 Cells|人子宫颈癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
Oka-C1细胞系相关产品:H-719细胞、NCI-H322细胞、HHFK细胞
T-98G细胞系相关产品:COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
PT-K75细胞系相关产品:KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
细胞生长:贴壁
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
DoTc2 4510 Cells|人子宫颈癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
2780CP细胞系相关产品:KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
RIN Cl-5F细胞系相关产品:SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞
Sol8细胞系相关产品:RAW2647细胞、Oregon J-111细胞、U-118MG细胞
SF 539细胞系相关产品:SNU739细胞、HTR-8/SV-neo细胞、NH6细胞
细胞传代方法:1:2—1:3传代,每周换液2—3次
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。传代细胞培养操作步骤:1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DoTc2 4510 Cells|人子宫颈癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
H-1838细胞系相关产品:SVG p12细胞、H1734细胞、WM-239A细胞
OVCA-432细胞系相关产品:MRC-5细胞、NCI-H209细胞、SCC90细胞
Scott细胞系相关产品:GOS3细胞、SCC 4细胞、SW1116细胞
UM2细胞系相关产品:Pt K1 (NBL-3)细胞、MDA-MB-435S细胞、Molm 14细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。
Eph4 1424细胞系相关产品:HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞
SMMC7721细胞系相关产品:CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
ATC241细胞系相关产品:HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
HEC-1B细胞系相关产品:HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞
639V细胞系相关产品:Hs695T细胞、OPM2细胞、SUDHL-4细胞
H-1623细胞系相关产品:HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞
HL-60 Clone 15细胞系相关产品:HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞
L5178YR细胞系相关产品:D10细胞、L M (TK-)细胞、NCIH748细胞
DoTc2 4510 Cells|人子宫颈癌细胞系
Human Hepatocyte Line 5细胞系相关产品:COLO206F细胞、NB.4细胞、Huh7.5细胞
Th17细胞系相关产品:MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞
EFM192C细胞系相关产品:C3H/10T1/2-clone8细胞、LS411N细胞、H3255_DA细胞
LIPF155C细胞系相关产品:DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞
H69细胞系相关产品:KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
H-1048细胞系相关产品:3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞
Neukoplast细胞系相关产品:HKF细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、TOV21G细胞
SNU-449细胞系相关产品:NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
SNU-449细胞系相关产品:NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
SK BR 03细胞系相关产品:3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞
NP-69细胞系相关产品:H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞系相关产品:A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞
NCI-H2347细胞系相关产品:KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞
PNT1A细胞系相关产品:RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞
U-138 MG细胞系相关产品:NCIH196细胞、A549/DDP细胞、VMRCRCZ细胞
SW839细胞系相关产品:RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞
H-1666细胞系相关产品:OCI-AML-2细胞、BE(2)M-17细胞、HCC1428细胞
TE-4细胞系相关产品:GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
HCET细胞系相关产品:NCI H295R细胞、FM88细胞、EA.hy 926细胞
UMR106细胞系相关产品:TGW-nu细胞、Panc203细胞、Mouse INsulinoma 6细胞
RCC-10RGB细胞系相关产品:Caco-2细胞、HCC0038细胞、NHLF细胞
SUSM-1细胞系相关产品:NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
SW1353细胞系相关产品:GP293细胞、L5178Y细胞、CAL-51细胞
U-251MG细胞系相关产品:SW1116细胞、EC-GI-10细胞、P 3 HR 1细胞
RL细胞系相关产品:SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞
mIMCD3细胞系相关产品:BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞
TCam 2细胞系相关产品:COLO-320-HSR细胞、OCI-Ly 7细胞、LNT-229细胞
WTRL1细胞系相关产品:AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
ROS 17/2.8细胞系相关产品:HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
TOV21细胞系相关产品:H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞
KTCTL-140细胞系相关产品:C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞
HGMC细胞系相关产品:MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
MDA-MB-175细胞系相关产品:293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞
H-548细胞系相关产品:HHL-5细胞、BMSC/hBMSCs细胞、HR8348细胞
A549/ATCC细胞系相关产品:DU-4475细胞、ReNcell CX细胞、CCD-841CoTr细胞
WERI-Rb1细胞系相关产品:GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品:ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品:ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞
NCIH378细胞系相关产品:COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞
SCC-7细胞系相关产品:NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞
PFSK-1细胞系相关产品:GT38细胞、Tu-212细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞
TFH细胞系相关产品:RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞
WM 239细胞系相关产品:PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞系相关产品:SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
LIXC-002细胞系相关产品:B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品:GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞
NCI-BL1339细胞系相关产品:Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞
HFF-1细胞系相关产品:MHCC 97-L细胞、McARH7777细胞、HCC827细胞
DV90细胞系相关产品:SRA01/04 (HLE)细胞、RenCa细胞、373 MG细胞
H-1184细胞系相关产品:MES23.5细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、MH-22a细胞
NCI-H2087细胞系相关产品:SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
DoTc2 4510 Cells|人子宫颈癌细胞系
MDA157细胞系相关产品:Mink Lung细胞、RBL 1细胞、OE-33细胞
67NR细胞系相关产品:Hs839T细胞、PT-67细胞、NFS60细胞
ATC241细胞系相关产品:HT 1080.T细胞、H4IIE细胞、HCC-1954BL细胞
CAL27细胞系相关产品:H1522细胞、GM05372E细胞、PTK 2细胞
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