"UACC-893 Cells|人乳腺导管癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
Hs-343-T细胞系相关产品:FL83B细胞、RCK-8细胞、HCT FET细胞
LA 4细胞系相关产品:T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞
BC-PAP细胞系相关产品:NMCG-1细胞、QG56细胞、WM 239A细胞
细胞生长:贴壁
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
UACC-893 Cells|人乳腺导管癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
PG-4细胞系相关产品:SuDHL 5细胞、786-O细胞、Karpas299细胞
EBTr (NBL-4)细胞系相关产品:Hep3B细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、HHL5细胞
HCC0078细胞系相关产品:HT144细胞、OVCAR-4细胞、HRCEC细胞
GC-1spg细胞系相关产品:SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性:贴壁生长
B16-F10-BL6细胞系相关产品:OVCAR.4细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NP69细胞
CaSki细胞系相关产品:HSF2细胞、EL 4细胞、KMS26细胞
LWnt3A细胞系相关产品:NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品:HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
LCMS细胞系相关产品:KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞
NCIH2030细胞系相关产品:DoHH-2细胞、RH-30细胞、GP2-293细胞
CV1细胞系相关产品:OVISE细胞、HSC细胞、H-2110细胞
OSKM-1细胞系相关产品:CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞
Ly3细胞系相关产品:NCI-H295R细胞、MDA-MB-330细胞、LLC-WRC 256细胞
NCI-H1693细胞系相关产品:MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞
HT1080细胞系相关产品:PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞
SF539细胞系相关产品:K562细胞、SJ-Rh 30细胞、3T3NIH细胞
UACC-893 Cells|人乳腺导管癌细胞系
RC-2细胞系相关产品:HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞
BHP 10-3细胞系相关产品:W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
NCIH2073细胞系相关产品:BCECs细胞、L23/P细胞、ECC1细胞
H-2171细胞系相关产品:H-2030细胞、MO59J细胞、HIT T-15细胞
CAMA细胞系相关产品:CAL 51细胞、TSU-Pr1细胞、H929细胞
BEAS 2B细胞系相关产品:NTERA-2细胞、MM1.S细胞、NCI-HUT-125细胞
COLO 205细胞系相关产品:H4-II-E细胞、SUM 102PT细胞、COLO_320DM细胞
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品:SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
H548细胞系相关产品:Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞
Capan2细胞系相关产品:H-460细胞、KMB 17细胞、DI TNC1细胞
HEEpiC细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
RH-30细胞系相关产品:IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞
HEL299细胞系相关产品:SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞
IAR 20细胞系相关产品:NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞
BT483细胞系相关产品:SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞
YH细胞系相关产品:NL-20细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞、NCIH596细胞
AKR细胞系相关产品:PA-TU S细胞、RS 4;11细胞、184A1细胞
NK-92MI细胞系相关产品:SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞
HCC-2935细胞系相关产品:746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞
U251细胞系相关产品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞
PLA-802细胞系相关产品:BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞
RMS1598细胞系相关产品:NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞
NCI-H847细胞系相关产品:Namalwa细胞、NCI-H-128细胞、IPLB-SF 21AE细胞
Lu-65细胞系相关产品:LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
CV 1细胞系相关产品:hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
Ha Fe细胞系相关产品:HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
EB-3细胞系相关产品:SW 1783细胞、SK-NM-C细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞
CCRF-CEM C1细胞系相关产品:HIMEC细胞、FaDu细胞、HCT-GEO细胞
SK-UT-1细胞系相关产品:TE-14细胞、3-LL细胞、HPAEpiC细胞
HLEC细胞系相关产品:50.B1细胞、HEK293A细胞、KE-39细胞
CMT 93细胞系相关产品:FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞
CTLL2细胞系相关产品:HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞
Hepa-RG细胞系相关产品:SF 763细胞、DHL4细胞、NCIH1373细胞
Panc-1-P细胞系相关产品:NCI-H460细胞、GM03570E细胞、PLA801-95D细胞
H-446细胞系相关产品:U251-MG细胞、Hs 888.T细胞、A9(Hamprecht)细胞
MA 104细胞系相关产品:IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
MA 104细胞系相关产品:IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
SCL2细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、4175细胞、TFK-1细胞
OCM1细胞系相关产品:CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞
JOSK-M细胞系相关产品:SKNO-1细胞、Colo699细胞、HcaF细胞
RINm-5F细胞系相关产品:Capan-2细胞、NCIH1781细胞、hs 68细胞
Hs-940细胞系相关产品:UCLA RO-81-A-1细胞、SK-Hep1细胞、751-NA-15细胞
Hs940-T细胞系相关产品:NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞
KP-4细胞系相关产品:ES-2细胞、IR983F细胞、P-19细胞
IOSE 80细胞系相关产品:H2330细胞、NALM-6细胞、FHC细胞
PGLH7细胞系相关产品:CHL-11细胞、293 EBNA细胞、OACP4C细胞
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品:SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
NCI-H1836细胞系相关产品:GRSL细胞、WM 266-4细胞、Jurkat 77细胞
SKMES细胞系相关产品:THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
UACC-893 Cells|人乳腺导管癌细胞系
H-1436细胞系相关产品:PNT1/A细胞、PLA-802细胞、C41细胞
BC3H-1细胞系相关产品:769P细胞、MES 13细胞、Calu3细胞
CV1细胞系相关产品:OVISE细胞、NCIH2052细胞、SUM-102细胞
RAW2647细胞系相关产品:Balb/c3T3细胞、NCIH647细胞、TN5B14细胞
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