"HCC202 Cells|人乳腺原发性导管癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
16-HBE细胞系相关产品:MN60细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、IPLB-Sf21-AE细胞
JJN3细胞系相关产品:DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
HEM细胞系相关产品:SW 1116细胞、KASUMI6细胞、NCI-446细胞
细胞生长:贴壁
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
HCC202 Cells|人乳腺原发性导管癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Hepa 1-6细胞系相关产品:H-2122细胞、UCH-1细胞、OCM1细胞
HHUA细胞系相关产品:U266BL细胞、Hs-578Bst细胞、NK92-MI细胞
HTori:3细胞系相关产品:KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞
NCI-SNU-C1细胞系相关产品:SH-SY5Y细胞、HeLa S3细胞、PC-9/GR细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC202 Cells|人乳腺原发性导管癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
HuH1细胞系相关产品:NCI-H747细胞、Wien133细胞、AKR细胞
GA-10 clone 4细胞系相关产品:P388.D1细胞、Hs 636 T细胞、SNU-869细胞
CL34细胞系相关产品:HuP-T4细胞、RCCJF细胞、OCI AML3细胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品:H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
FD-LSC-1细胞系相关产品:DI-TNC1细胞、DK-MG细胞、C127细胞
CD 18细胞系相关产品:KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
MDAMB361细胞系相关产品:HuH-6细胞、SW1783细胞、HT1080细胞
SK-NM-C细胞系相关产品:HUVSMC细胞、WM 2664细胞、SO-Rb 50细胞
OCI/AML5细胞系相关产品:ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
Vx-2细胞系相关产品:HuPT3细胞、GL-261细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞
NTERA-2cl.D1细胞系相关产品:DHBE细胞、MDA PCa 2b细胞、KCL22S细胞
H-820细胞系相关产品:PC-3M IE8细胞、HNE-2细胞、Onda 11细胞
HCC202 Cells|人乳腺原发性导管癌细胞系
MCF7ADR细胞系相关产品:SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞
HepG2细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞
Farage Original Line细胞系相关产品:IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
Line 870 Emory University-4细胞系相关产品:CCD841CoTr细胞、U343细胞、Wien-133细胞
MIA PaCa-2细胞系相关产品:NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品:Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞
HRGEC细胞系相关产品:OCI-LY-18细胞、HTR8svn细胞、RERF-LCMS细胞
OCM-1细胞系相关产品:BV-173细胞、GM03320D细胞、Mv1.Lu细胞
OCM-1细胞系相关产品:BV-173细胞、GM03320D细胞、Mv1.Lu细胞
BV173细胞系相关产品:RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
Jurkat FHCRC细胞系相关产品:SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞
BHT101细胞系相关产品:NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
SK-N-MC细胞系相关产品:Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
CL1细胞系相关产品:BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞
TCC Sup细胞系相关产品:Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
PANC 327细胞系相关产品:HepG2/C3A细胞、PC-3M IE8细胞、2E8细胞
PLA802细胞系相关产品:CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
NS1-1 Ag4.1细胞系相关产品:H-1238细胞、PANC1005细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞
RPMI #8226细胞系相关产品:He La细胞、LICR-LON-HN6-R细胞、SKNBE-2细胞
EFM-192B细胞系相关产品:NCIH548细胞、CEK细胞、Hs 578T细胞
3T3-442A细胞系相关产品:SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞
HECCL-1细胞系相关产品:K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
NCI-H2106细胞系相关产品:Institute for Medical Research-32细胞、SK-OV-433细胞、VMM-5A细胞
A72细胞系相关产品:JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
GM17346细胞系相关产品:A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞
NR-8383细胞系相关产品:SU4细胞、NK92细胞、HFL 1细胞
PLB 985细胞系相关产品:SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞
FRhK4细胞系相关产品:NCIH508细胞、CCLP-1细胞、Tn 5B1-4细胞
bEnd.3[BEND3]细胞系相关产品:H1819细胞、FL83B细胞、BC3 H1细胞
Bovine ENDometrial cells细胞系相关产品:N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
TGW-nu-1细胞系相关产品:Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞
KM-H2细胞系相关产品:HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞
HeLa.S3细胞系相关产品:ND7/23细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞、BT474细胞
Pro-5 Lec1.3c细胞系相关产品:HuH28细胞、VM Cub 1细胞、HS-294T细胞
SW1417细胞系相关产品:B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
JB6 clone 30, subclone 7b细胞系相关产品:JB6 Cl 30细胞、RS4;11细胞、RC92A细胞
MuM-2C细胞系相关产品:Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
GB1细胞系相关产品:COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
RKO-AS45-1细胞系相关产品:HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
L929细胞系相关产品:NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
SK-Mel 1细胞系相关产品:Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞
Detroit-562细胞系相关产品:T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
HO-8910细胞系相关产品:H2081细胞、LA-795细胞、SUM159PT细胞
WM-451Lu细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞、H-1666细胞、LN-18细胞
BALB/3T3细胞系相关产品:GM03573细胞、HEL 92.1.7细胞、T9细胞
SK Mel28细胞系相关产品:USMC细胞、KU 812F细胞、RWPE-2细胞
NH-6细胞系相关产品:SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
SNU-869细胞系相关产品:P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞
C12细胞系相关产品:DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
Fox/NY细胞系相关产品:ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞
HCC202 Cells|人乳腺原发性导管癌细胞系
SCC4细胞系相关产品:COLO 201细胞、Panc 02细胞、TE32细胞
MC-3T3-E1细胞系相关产品:NUGC-4细胞、HEC-251细胞、NCIH1417细胞
MDAMB361细胞系相关产品:HuH-6细胞、Hs606细胞、SEM细胞
D10.G4.1细胞系相关产品:H2073细胞、SuDHL 4细胞、RGM-1细胞
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