"SK-N-FI Cells|人脑神经母细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
NCI-H2228细胞系相关产品:HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞
P3HR1细胞系相关产品:SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
NTERA2-D1细胞系相关产品:TGBC11TKB细胞、H378细胞、BT-549细胞
细胞生长:贴壁
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
SK-N-FI Cells|人脑神经母细胞瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
HemECs细胞系相关产品:Beta-TC-6细胞、H-1184细胞、COS-7细胞
MKN 7细胞系相关产品:MCAEC细胞、COR-L279细胞、JEG-3细胞
RAG细胞系相关产品:HFTF细胞、OSRC2细胞、CD18细胞
HUT-125细胞系相关产品:HEL-92_1_7细胞、hTERT-RPE-1细胞、VeroE6细胞
细胞传代方法:1:4传代,每周换液2次
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性:贴壁生长
MDA-MB-435S细胞系相关产品:Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞
J774 A1细胞系相关产品:Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞
PLA-801C细胞系相关产品:FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞
Hs 294T细胞系相关产品:NTERA-2 clone D1细胞、OVCAR.5细胞、CHL细胞
细胞培养无菌操作步骤和注意事项:1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯,消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯,打开超净台风机,等待30min以上,以排尽臭氧。3.穿好隔离衣,戴好口罩,帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手,擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管,滴管,试管,培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火,以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰,镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台,应使瓶口斜置,应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系;吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm,避免伸入培养瓶口或试管口;以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体,立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
RCC 786-O细胞系相关产品:IM95细胞、NCI-H1869细胞、T-84细胞
WEHI-3细胞系相关产品:BERH-2细胞、PC-12细胞、SKGT4细胞
Panc02细胞系相关产品:P815细胞、KTA-7细胞、CHOS细胞
OCI AML2细胞系相关产品:MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
MNNG/HOS细胞系相关产品:H2195细胞、Hs-852-T细胞、OCI-LY-3细胞
SuDHL 8细胞系相关产品:ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞
MiaPaca.2细胞系相关产品:MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
CX-1细胞系相关产品:MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
SK-N-FI Cells|人脑神经母细胞瘤细胞系
Mo7e细胞系相关产品:H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞
CCD-841-CoTr细胞系相关产品:MEF (CF-1)细胞、LS513细胞、HCoEpiC细胞
WEHI-164细胞系相关产品:HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
Hep3B细胞系相关产品:P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞
NCI-BL6细胞系相关产品:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
PG-BE1细胞系相关产品:H-1792细胞、SUPT-1细胞、H510A细胞
KCL22细胞系相关产品:GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞
SHG 44细胞系相关产品:HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
SHG 44细胞系相关产品:HD-LM-2细胞、Hs840T细胞、RT4-D6P2T细胞
95C细胞系相关产品:BT474细胞、Lu-99A细胞、UO.31细胞
COS-7细胞系相关产品:U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞
OVCA433_Bast细胞系相关产品:AE 1201细胞、Bat lung细胞、T1-73细胞
H-1105细胞系相关产品:UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞
Ly18细胞系相关产品:NCIH28细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞
SW620细胞系相关产品:Granta 519细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、Vero-76细胞
Normal Rat Kidney-52E细胞系相关产品:U-138-MG细胞、MDA-MB157细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞
C41细胞系相关产品:HEK293-A细胞、C2A细胞、EMT6细胞
RC-2细胞系相关产品:HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞
ST486细胞系相关产品:GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞
Hep 3B细胞系相关产品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、SNGM细胞、HEK 293 c18细胞
Hep-3B细胞系相关产品:Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞
SNU761细胞系相关产品:NCIH1694细胞、H1755细胞、Bac 1.2F5细胞
H1993细胞系相关产品:Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞
SJRH-30细胞系相关产品:MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
Tb 1 Lu细胞系相关产品:MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞
BNL CL2细胞系相关产品:BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞
HEK293T/17细胞系相关产品:SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞
TE7细胞系相关产品:NCI-H1417细胞、CPA 47细胞、UM-UC-14细胞
U-251 MG细胞系相关产品:AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞
TK10细胞系相关产品:KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞
Lec1细胞系相关产品:ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
HANK1细胞系相关产品:MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
SCC VII细胞系相关产品:AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
EFM192A细胞系相关产品:X63-Ag8-653细胞、HSC(Human Schwann)细胞、SU-DHL-8细胞
BJA-B细胞系相关产品:Y3Ag1.2.3细胞、NE-1细胞、BC-020细胞
MC-26细胞系相关产品:HCC-1428细胞、C3A细胞、Hs 683细胞
LS-123细胞系相关产品:Hs 739.T细胞、HEK293-F细胞、H2330细胞
NCI-H2135细胞系相关产品:DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
AM38细胞系相关产品:RPMI8226/S细胞、VMRCLCD细胞、Co 205细胞
HIEC6细胞系相关产品:JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞
MDA468细胞系相关产品:QSG-7701细胞、FHs74Int细胞、HFSF细胞
SKNDZ细胞系相关产品:751-NA-15细胞、HCC366细胞、PFSK-1细胞
1E8-H细胞系相关产品:RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
SKBR-3细胞系相关产品:RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
OV-2008细胞系相关产品:IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
HSC-6细胞系相关产品:PC3M-2B4细胞、OVCAR.8细胞、Ca Ski细胞
SKMEL-24细胞系相关产品:MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞
NK62a细胞系相关产品:OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
NCIH1694细胞系相关产品:GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞
SK-N-F1细胞系相关产品:Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞
BN-CL2细胞系相关产品:SW-1271细胞、OCI/AML-4细胞、Calu-3细胞
SK-N-FI Cells|人脑神经母细胞瘤细胞系
NCI-H1299细胞系相关产品:COR-L23细胞、CCRF/CEM细胞、KYSE140细胞
Fox/NY细胞系相关产品:ZR751细胞、H-209细胞、JCA1细胞
Panc02细胞系相关产品:P815细胞、Hs 688(A).T细胞、PIG1细胞
FD-LSC-1细胞系相关产品:NCI-H2029细胞、G361细胞、Z310细胞
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