"DBTRG-05MG Cells|人脑胶质母细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
MDA361细胞系相关产品:HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞
A1847细胞系相关产品:NCI-H345细胞、NCI-H647细胞、P-2003细胞
NCI-H2198细胞系相关产品:Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞
细胞生长:贴壁
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
DBTRG-05MG Cells|人脑胶质母细胞瘤细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
L5178-R细胞系相关产品:Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞
MA 104细胞系相关产品:IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
Fao细胞系相关产品:RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
801-D细胞系相关产品:IPEC1细胞、Panc02细胞、PANC0813细胞
细胞传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次。
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DBTRG-05MG Cells|人脑胶质母细胞瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
MSB-1细胞系相关产品:WEHI3细胞、MC57细胞、NBL-5细胞
CCC-ESF-1细胞系相关产品:H1781细胞、Namalwa细胞、MB231细胞
LC1sq细胞系相关产品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、RPMI-8226S细胞、RenCa细胞
MLMA细胞系相关产品:NCI-H727细胞、COLO-16细胞、SW1417细胞
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
H446细胞系相关产品:SUIT 2细胞、OV-CA 432细胞、SF 767细胞
Granta519细胞系相关产品:TE15细胞、Balb/c 3T3细胞、Ishikawa细胞
HCC1171细胞系相关产品:Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
NCIH1436细胞系相关产品:RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞
Kit225-K6细胞系相关产品:NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
SPC-A1细胞系相关产品:H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞
RN细胞系相关产品:SCC-4细胞、4T1细胞、NCI-H1963细胞
LM2-4175细胞系相关产品:Spodoptera frugiperda clone 9细胞、MHCC97细胞、T-98G细胞
DBTRG-05MG Cells|人脑胶质母细胞瘤细胞系
SIRC细胞系相关产品:YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞
Vero 76 clone E-6细胞系相关产品:SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
MDA-MB 453细胞系相关产品:LoVo细胞、NCI-H727细胞、2780CP细胞
RIN-m细胞系相关产品:MOLM-13细胞、DMS 53细胞、BMU-S1细胞
U87MG细胞系相关产品:OE-19细胞、EFM-192C细胞、BHK 21细胞
PLC-PRF-5细胞系相关产品:NCIH345细胞、DU 4475细胞、207细胞
Panc-08.13细胞系相关产品:C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞
COLO 16细胞系相关产品:EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞
MKN74细胞系相关产品:AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞
IMR-90细胞系相关产品:LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞
OVCAR420细胞系相关产品:SiHa细胞、MDA MB 134VI细胞、SF767细胞
RFL 6细胞系相关产品:BT 325细胞、HEC1-A细胞、SUM52细胞
G-401细胞系相关产品:NCIH889细胞、OC316细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞
SCLC21H细胞系相关产品:OCM-1A细胞、Balb/c3T3细胞、MDA-MB-231 #4175细胞
NP69SV40T细胞系相关产品:MC3T3E1细胞、HOEC细胞、MGHU1细胞
HVSMC细胞系相关产品:OCI-AML5细胞、1.1B4细胞、BLO 11细胞
MDA-MB-134VI细胞系相关产品:OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞
WM-115细胞系相关产品:NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞
NCI-H1944细胞系相关产品:RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞
KTCTL140细胞系相关产品:H-2009细胞、Evsa-T细胞、COLO 678细胞
H-2291细胞系相关产品:SuDHL 4细胞、BCaP-37细胞、HeLa/DDP细胞
MBT2细胞系相关产品:PC-9/GR细胞、M-14细胞、MHCC97H细胞
LA-N-5细胞系相关产品:Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NIH:OVCAR-8细胞、LAD-2细胞
PCI:SG231细胞系相关产品:NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
2B4细胞系相关产品:MOPC细胞、PK 15细胞、KY180细胞
Panc4.03细胞系相关产品:RMG-1细胞、EB2细胞、Melanoma 14细胞
L-Wnt-3A细胞系相关产品:MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞
KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
SK Mel 1细胞系相关产品:OVCAR 5细胞、MUG-Chor1细胞、SW-579细胞
BALL-1细胞系相关产品:HepG2细胞、SACC-LM细胞、LCLC-103H细胞
DAKIKI Clone 1细胞系相关产品:A-431细胞、766T细胞、LLC-MK-2细胞
SKES-1细胞系相关产品:EFM-192B细胞、WRL 68细胞、KMB-17细胞
C-4I细胞系相关产品:BMF细胞、YH-13细胞、Pa18C细胞
NCI-SNU-475细胞系相关产品:PANC-02-03细胞、Madison细胞、BHP-10细胞
HT55细胞系相关产品:SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品:HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
SEG1细胞系相关产品:NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞
Centre Antoine Lacassagne-62细胞系相关产品:MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品:OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
Los Angeles Prostate Cancer-4细胞系相关产品:SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞
JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞
HS-294细胞系相关产品:KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞
FDC-P1细胞系相关产品:CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞
HuP-T3细胞系相关产品:SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞
U87MG细胞系相关产品:OE-19细胞、EFM-192C细胞、BHK 21细胞
W256细胞系相关产品:HUC细胞、SNU-739细胞、SKMES1细胞
Wayne State University-Head and Neck 13细胞系相关产品:NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞
Microbiological Associates-104细胞系相关产品:HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞
SNU-668细胞系相关产品:Mac-1细胞、EU-4细胞、NCI-H660细胞
UMRC-2细胞系相关产品:RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
SNU449细胞系相关产品:BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞
DBTRG-05MG Cells|人脑胶质母细胞瘤细胞系
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品:HPDE细胞、Mhh-Call 2细胞、JROECL33细胞
SUM 159细胞系相关产品:C8-D1A细胞、SNT-8细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞
HCC-1171细胞系相关产品:MCF-10A细胞、MDCK细胞、7860细胞
L 540细胞系相关产品:HEK-EBNA细胞、SaOS-2细胞、CAL-33细胞
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