"Daoy Cells|人脑髓母细胞瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
MG63细胞系相关产品：SW 1271细胞、VP 229细胞、SW 13细胞
BAC1.2F5细胞系相关产品：LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
细胞生长：贴壁
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
Daoy Cells|人脑髓母细胞瘤细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞
BpRcl细胞系相关产品：HTR-8/SV neo细胞、NCI-H508细胞、ARH 77细胞
NCIH1915细胞系相关产品：SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品：ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
细胞传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。
细胞培养温度：维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为３６.５℃±０.５℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强，温度上升不超过３９℃时，细胞代谢与温度成正比；人体细胞在３９-４０℃１小时，即能受到一定损伤，但仍有可能恢复；在４０-４１℃１小时，细胞会普遍受到损伤，仅小半数有可能恢复；４１-４２℃１小时，细胞受到严重损伤，大部分细胞死亡，个别细胞仍有恢复可能；当温度在４３℃以上１小时，细胞全部死亡。相反，温度不低于０℃时，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用；把细胞放入２５－３５℃时，细胞仍能生存和生长，但速度减慢；放在４℃数小时后，再回到３７℃培养，细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时，细胞可因胞质结冰受损而死亡。但是，如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油)，可在深低温下如－８０℃或－１９６℃(液氮)长期保存。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
Daoy Cells|人脑髓母细胞瘤细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
SNB.19细胞系相关产品：LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞
P30OHK细胞系相关产品：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
HCC-1171细胞系相关产品：MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞
NIH:OVCAR3细胞系相关产品：NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
贴壁消化难题：１，先用PBS 把细胞洗两遍，使瓶内没有血清了，减少对胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在细胞有些消化下来时，拿着瓶口，运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体，这样细胞很快就下来了，还不需要吹打，分散也均匀；２，成团、絮状：消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象，血清可以终止胰酶的作用，如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基，加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势)，随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验，则不能弃去胰酶)，加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代，否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片)；消化过度：马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中８００RPM ３分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养，状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！
BL1339细胞系相关产品：L363细胞、OVISE细胞、H-358细胞
J45.01细胞系相关产品：H-87细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、KYSE0030细胞
HEK-2细胞系相关产品：HCC0366细胞、SUM-102细胞、Namalva细胞
HGMC细胞系相关产品：MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
HEC151细胞系相关产品：Monomac-1细胞、LN-382细胞、253J细胞
CEF细胞系相关产品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
HT 144细胞系相关产品：CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
A-253细胞系相关产品：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
Daoy Cells|人脑髓母细胞瘤细胞系
Sp 2817细胞系相关产品：RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞
BLO11细胞系相关产品：H508细胞、H522细胞、C918细胞
PC3M细胞系相关产品：BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞
HCC-1359细胞系相关产品：SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
CMT 167细胞系相关产品：LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
H-2330细胞系相关产品：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
SW-1783细胞系相关产品：FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞
NCIH292细胞系相关产品：HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞
NCIH292细胞系相关产品：HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞系相关产品：H-1623细胞、H-719细胞、OVSAHO细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
NCI-H1184细胞系相关产品：H748细胞、L363细胞、Hs 870.T细胞
C2-C12细胞系相关产品：AQ-Mel细胞、WEHI3细胞、KYSE-450细胞
MDAMB435S细胞系相关产品：Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
Panc3_27细胞系相关产品：PG13细胞、Hs 746.T细胞、SVG p12细胞
PLMVEC细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
HCC1008细胞系相关产品：HCC1588细胞、REC细胞、SNU-16细胞
PC 12细胞系相关产品：RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞
Panc_05_04细胞系相关产品：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞
MLA144细胞系相关产品：HCA7细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、Scott and White No. 13细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
NCI660细胞系相关产品：87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
NCIH2029细胞系相关产品：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
SK-MEL-31细胞系相关产品：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
GM07404A细胞系相关产品：SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
H4IIE细胞系相关产品：H-1975细胞、M109细胞、C4I细胞
H676细胞系相关产品：HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞
KPL1细胞系相关产品：HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
MDA-MB 468细胞系相关产品：U373细胞、SKMEL5细胞、ARPE19细胞
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
IB-RS-2细胞系相关产品：CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
rRMECs细胞系相关产品：NEC-8细胞、751-NA细胞、U 937细胞
211H细胞系相关产品：Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞
R1800[RA]细胞系相关产品：EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
Human podocyte细胞系相关产品：L(TK-)细胞、ECC12细胞、Daoy细胞
OAC-P4C细胞系相关产品：Hut292细胞、Karpas 422细胞、AG06814-M细胞
J774 A.1细胞系相关产品：SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞
OCI-Ly10细胞系相关产品：RIN-m 14B细胞、Hs 578T细胞、P388.D1细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品：NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
Jurkat FHCRC细胞系相关产品：SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞
SW1088细胞系相关产品：P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
LA-N-6(OAN)细胞系相关产品：Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞
22Rv1细胞系相关产品：MDA.MB.231细胞、GM04680细胞、UT-7细胞
3T3-F442A细胞系相关产品：rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞
NCI-H1793细胞系相关产品：Sol8细胞、Colo-678细胞、H-2135细胞
SKRC-42细胞系相关产品：H-1618细胞、Ra No. 1细胞、NK-92MI细胞
SK-N-SH细胞系相关产品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、DMS-79细胞、STC-1细胞
HCE细胞系相关产品：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞
U118细胞系相关产品：HNE-2细胞、GM17346细胞、MRAEC细胞
HuH1细胞系相关产品：NCI-H747细胞、Wien133细胞、AKR细胞
HS-294T细胞系相关产品：HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞
Daoy Cells|人脑髓母细胞瘤细胞系
HuPT4细胞系相关产品：MC-38细胞、CEM-0细胞、Panc 04.03细胞
HOP92细胞系相关产品：MCF.7细胞、NUGC3细胞、251 MG细胞
HEK293细胞系相关产品：U-343-MG细胞、A375S2细胞、MA-c细胞
BNL-HCC细胞系相关产品：A 549细胞、OsACL细胞、Panc-1-P细胞
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