抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、产品仅用于科研进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-APPBP2
中文名称 β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体
别 名 amyloid beta precursor protein (cytoplasmic tail) binding protein 2; Amyloid beta precursor protein-binding protein 2; Amyloid protein binding protein 2; Amyloid protein-binding protein 2; APBP2_HUMAN; APP BP2; APP-BP2; Appbp2; PAT1; Ara67 Protein interacting with APP tail 1.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Zebrafish
产品类型 一抗
研究领域 免疫学 神经生物学 Alzheimer's
蛋白分子量 predicted molecular weight: 67kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APPBP2
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.产品仅用于科研用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
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L色标准品 规格:200mg 英文名称:LTryptophan
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4氢树脂 进口、国产 MBHAresin 含量:BR
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ENAH蛋白抗体Benzo-15-crown 5-ether中文名:苯并-15-冠5-醚别名:分子式:C14H20O5
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真核翻译起始因子4E抗体9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene中文名:9,10-双(3,5-二羟苯基)蒽别名:分子式:C26H18O4
早期B淋巴细胞因子1抗体3',5'-Anhydrothymidine中文名:3',5'-脱水胸苷别名:分子式:C10H12N2O4
表皮生长因子受体抗体Artesunate中文名:青蒿琥酯别名:分子式:C19H28O8
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体 Listeria ivanovii种属:Listeria ivanovii
提供形式:冻干物
安全等级:2
模式菌株:no
应用领域:研究;分析检测。研究、质量控制,《GB 4789.30-2010单核细胞增生李斯特氏菌检验》阳性对照菌株。
培养方法
培养基:脑心琼脂:心提取物 5.0g,脑提取物 12.5g,月示 胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH7.4。
生长条件:37℃,兼性厌氧。
生长特性G+短棒状小杆菌,有动力,过氧化氢酶阳性,血平板上产生β-溶血;盐还原实验阴性,尿素酶试验阴性,不发酵鼠李糖、甘露醇;甲基红反应阳性,伏-普实验阳性,发酵葡萄糖、麦芽糖、七叶苷、木糖;三糖铁试验产酸、不产硫化氢;兼性厌氧,最适pH7.4~7.6。
存储条件:2-8℃;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法伊氏李斯特氏菌