抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、产品仅用于科研进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-ABCG8
中文名称 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体
别 名 ATP binding cassette sub family G (WHITE) member 8 (sterolin 2); ATP binding cassette sub family G member 8; MGC142217; Sterolin 2; STSL; ABCG8_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子 转运蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 76kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABCG8
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.产品仅用于科研用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
下列是三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体 的相关热销产品:
葑 2,4Diaminoisopropoxy,3,5triazine 质量规格:>98.0%(T)锌指蛋白913一抗
杨梅苷 2,4Diamino,3,5triazine 质量规格:>98.0%(T)锌指蛋白749一抗
L鼠李糖 2,4Diaminomethoxy,3,5triazine 质量规格:>98.0%(T)锌指蛋白450一抗
人参皂苷Ro 2,4Diaminodimethylamino,3,5triazine 质量规格:>98.0%(T)锌指蛋白20D3一抗
三白草 Ethylene Glycol Bis[4(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether 质量规格:>98.0%(GC)锌指蛋白804A一抗
3,5二基 Ethylene Glycol Bis(4carboxyphenyl) Ether 质量规格:>95.0%(T)负调控因子白细胞介素2一抗
兔抗绵羊IgG (纯化... 9,9Bis[4(2hydroxyethoxy)phenyl]fluorene 质量规格:>98.0%(GC)锌指蛋白BED3一抗
兔抗大鼠IgG (纯化... preELM1 质量规格:>98.0%(T)锌指蛋白379一抗
羊抗兔IgG (纯化一抗) Pyromellitic Acid 质量规格:>98.0%(T)锌指蛋白431一抗
羊抗小鼠IgG (纯化... 1,4Bis[(1Himidazolyl)methyl]benzene 质量规格:>98.0%(GC)锌指蛋白185一抗
兔抗猴IgG (纯化一抗) 2,2'Diamino,4'bithiazole 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)锌结合醇脱氢酶结构域蛋白2一抗
羊抗人白蛋白 (纯化... 1HImidazole,5dicarboxylic Acid 质量规格:>97.0%(HPLC)(T)锌指蛋白909一抗
羊抗人IgM (μ链特... 2,6Naphthalenedicarboxylic Acid 质量规格:>98.0%(GC)(T)γ基丁A受体相关膜蛋白3
羊抗人IgG (纯化一抗) 1,4Naphthalenedicarboxylic Acid 质量规格:>95.0%(T)锌指蛋白288一抗
兔抗人IgG F(ab)2 (... Pyrazine 质量规格:>98.0%(GC)锌指蛋白ZBTB38一抗
羊抗人IgA (α链特... 2,3Pyrazinedicarboxylic Acid 质量规格:>98.0%(HPLC)(T)锌指蛋白693一抗
羊抗人IgG/A/M (纯... pAnisil 质量规格:>98.0%(GC)锌指蛋白ZBTB12一抗
磷酸化原癌蛋白CBL2抗体Isomartynoside中文名:异地黄苷别名:分子式:C31H40O15
细胞分裂周期蛋白25抗体Gallic acid中文名:没食子酸别名:3,4,5-Trihydroxybenzoic acid分子式:C7H6O5
半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗体5,7-Dihydroxychromone中文名:5,7-二羟基色原酮别名:分子式:C9H6O4
CRX抗体Orcinol中文名:苔黑酚别名:5-Methyl-1,3-benzenediol; 地衣酚分子式:C7H8O2
环腺苷酸应答元件结合蛋白抗体Antiarol rutinoside中文名:别名:3,4,5-Trimethoxyphenyl rutinoside分子式:C21H32O13
三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体 Salmonella meleagridis种属:Salmonella meleagridis
提供形式:冻干物
安全等级:2
模式菌株:no
应用领域:研究、质量控制
培养方法
培养基:营养肉汁琼脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生长条件:36℃,好氧
存储条件:真空冷冻干燥法火鸡沙门氏菌