抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,产品仅用于科研如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
凋亡相关蛋白激酶1抗体 别 名 DAP Kinase 1; DAPK1; DAK1; DAP K1; DAPK 1; DAPK; DAPK1; Death Associated Protein Kinase 1; Death Associated Protein Kinase 1; Death-associated protein kinase 1; DKFZp781I035; DAPK1_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
英文名称 Anti-DAPK1
中文名称 凋亡相关蛋白激酶1抗体
研究领域 肿瘤 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 160kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DAPK1 C-terminus
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
产品仅用于科研如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的最主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
含试剂:
1、一抗(应用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、无色试剂:内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A:封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B:生物素标记二抗工作液:生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C:辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液(白色)20ml
马兰草英文名称:Ma Lancao保存:20℃,避光规格:2g环指蛋白88一抗
薄芝菌丝体粉英文名称:Bozhi mycelium powder保存:20℃,避光规格:2g锌指蛋白抑制NFκB蛋白一抗
宽叶缬草英文名称:Latifolia保存:20℃,避光规格:1g环指蛋白98一抗
紫色姜英文名称:Purple ginger保存:20℃,避光规格:0.5g端粒酶结合蛋白P23一抗
结石草英文名称:Stone grass保存:20℃,避光规格:2g生精细胞凋亡相关基因6一抗
莪术(温郁金)英文名称:Zedoary (Wen Yujin)保存:20℃,避光规格:1g转移生长因子β受体3一抗(TGFβRⅢ,TGFβRⅢ)
甘草(胀果甘草)英文名称:Licorice (Glycyrrhiza inflata)保存:20℃,避光规格:1g端粒酶相关蛋白1一抗
见血飞英文名称:See blood fly保存:20℃,避光规格:1g谷酰转酶3一抗
羊奶奶叶英文名称:Yang grandma leaves保存:20℃,避光规格:5.0g凝血酶(凝血因子II)重链一抗
大果木姜子英文名称:Large fruit Jiang Zi保存:20℃,避光规格:3gToll样受体1一抗
隔山消英文名称:Geranium Strictipes保存:20℃,避光规格:1gDNA拓普西异构酶ⅡA一抗
石吊兰英文名称:Shi Diaolan保存:20℃,避光规格:2g三叶肽因子2一抗
蒺藜英文名称:Tribulus terrestris保存:20℃,避光规格:3g端粒结合蛋白2一抗
薯莨英文名称:Dioscorea cirrhosa保存:20℃,避光规格:0.2g精子形成相关凋亡蛋白7一抗
紫菀英文名称:Aster保存:20℃,避光规格:1g辣椒素受体一抗
黄芩英文名称:Baikal Skullcap保存:20℃,避光规格:0.5g肿瘤坏死因子α诱导蛋白1一抗
饿蚂蝗英文名称:Manyflower tickclove herb保存:20℃,避光规格:1g胸腺肽α1一抗
阳离子转运调控样蛋白1抗体Methyl 3,4,5-trimethoxybenzoate中文名:3,4,5-三甲氧基苯甲酸甲酯别名:分子式:C11H14O5
细胞死亡活化蛋白抗体3-Hydroxy-8,9-methylenedioxypterocarpene中文名:别名:分子式:C16H10O5
5号染色体开放阅读框44抗体5-Hydroxy-1,7-diphenyl-6-hepten-3-one中文名:别名:分子式:C19H20O2
心脏特异性丝氨酸蛋白酶抗体6-Hydroxybenzofuran-2(3H)-one中文名:别名:分子式:C8H6O3
细胞色素P450Ⅱj3抗体4-Hydroxybenzamide中文名:别名:分子式:C7H7NO2
凋亡相关蛋白激酶1抗体 Aerococcusurinae种属:Aerococcusurinae
分离基物:人类的尿路感染,丹麦
安全等级:1
模式菌株:yes
培养方法
培养基:58
生长条件:30℃,厌氧脲气球菌