抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,产品仅用于科研如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
牙本质磷蛋白抗体 别 名 Dentin phosphophoryn; Dentin phosphoprotein; dentin phosphoryn; Dentin sialophosphoprotein; Dentin sialophosphoprotein precursor; Dentin sialoprotein; dentinogenesis imperfecta 1; DFNA39; DGI1; DMP3; DPP; DSP; Dspp; DSPP_HUMAN; DTDP2.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
英文名称 Anti-DSPP/Dentin phosphophoryn
中文名称 牙本质磷蛋白抗体
研究领域 细胞生物 发育生物学 信号转导 细胞周期蛋白 结合蛋白 细胞分化 细胞骨架 细胞外基质
蛋白分子量 predicted molecular weight: 47/129kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DSPP/Dentin phosphophoryn
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
产品仅用于科研如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的最主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
含试剂:
1、一抗(应用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、无色试剂:内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A:封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B:生物素标记二抗工作液:生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C:辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液(白色)20ml
白头翁皂苷B4;白头翁皂甙B4英文名称:Pulsatilla Saponin B4; Pulsatilla Saponin B4保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支跨膜蛋白TMED4一抗
刺囊英文名称:Echinocystic acid保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支谷酰转酶2一抗
二欧山芹素英文名称:Two hydrogen European mountain Qin Su保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支T淋巴细胞膜蛋白4一抗
佛司可林英文名称:Forskolin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支末端脱氧核苷转移酶一抗
美迪紫檀素英文名称:Medicarpin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 5mg/支肺癌抑癌蛋白1一抗
异泽兰黄素英文名称:Eupatilin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支前列腺癌抑癌蛋白3一抗
伞形花内、7羟香豆英文名称:Umbelliferone and 7 hydroxy coumarin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支抑癌基因5一抗
耐斯糖;蔗果四糖英文名称:Nice sugar; four sugar cane fruit保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支脑肿瘤抑癌蛋白1一抗
异甘草苷英文名称:Isoliquiritin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支肿瘤蛋白p53诱导蛋白13(肿瘤抑制基因)
甘草素;甘草、甘草黄配质英文名称:Glycyrrhizin; licorice alcohol, liquiritigenin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支肿瘤坏死因子受体1一抗
异甘草素英文名称:Isoliquiritigenin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支MAPK调控蛋白TRB2一抗
甘草单铵盐;甘草铵英文名称:Glycyrrhizic acid ammonium salt; ammonium glycyrrhizinate保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支脑源性tau蛋白激酶一抗
光甘草定英文名称:Glabridin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支破伤风毒素重链一抗
刺甘草查尔英文名称:Stab the licorice chalcone保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支基移换酶样蛋白1一抗
甘草查尔A英文名称:Licochalcone A保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支睾丸特异激酶底物蛋白一抗
次黄嘌呤、6羟嘌呤英文名称:Hypoxanthine and xanthine 6保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支MED17一抗
鸟嘌呤、鸟粪素英文名称:Guanine, guanine保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支状腺激素受体相互作用13/乳头瘤16型E1结合蛋白一抗
凋亡加强结构域蛋白4抗体Isomedicarpin中文名:别名:9-Hydroxy-3-methoxypterocarpan分子式:C16H14O4
4号染色体开放阅读框34抗体Iriflophenone 2-O-rhamnoside中文名:别名:分子式:C19H20O9
酪蛋白激酶1γ3/CKI γ3抗体3,4-Dimethoxybenzoic acid中文名:别名:分子式:C9H10O4
凋亡加强结构域蛋白9抗体3-Methoxy-5-heneicosylphenol中文名:别名:5-Heneicosylresorcinol 3-O-methyl ether分子式:C28H50O2
凋亡加强结构域蛋白8抗体Iriflophenone中文名:鸢尾酚酮别名:分子式:C13H10O5
牙本质磷蛋白抗体 Corynebacteriumulcerans种属:Corynebacteriumulcerans
分离基物:人的喉咙,英国
安全等级:1
模式菌株:no
培养方法
培养基:113
生长条件:37℃溃疡棒状杆菌