抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,产品仅用于科研如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
肌营养不良蛋白抗体 别 名 Alternative namesApo dystrophin; BMD; CMD3B; DMD; DMD_HUMAN; Duchenne muscular dystrophy protein; DXS142; DXS164; DXS206; DXS230; DXS239; DXS268; DXS269; DXS270; DXS272; Dystrophin; Muscular dystrophy Duchenne and Becker types.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
英文名称 Anti-Dystrophin/DMD
中文名称 肌营养不良蛋白抗体
研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导 干细胞 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 405kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Dystrophin/DMD
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
产品仅用于科研如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
抗体反应特点:
1.高度特异性,特异性是抗原抗体反应的最主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
含试剂:
1、一抗(应用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、无色试剂:内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A:封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B:生物素标记二抗工作液:生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C:辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液(白色)20ml
蛤油英文名称:Toad oil保存:20℃,避光规格:1g化化丝/苏激酶p90RSK蛋白一抗
龙胆花英文名称:Gentian flowers保存:20℃,避光规格:0.5gATP依赖解旋酶RENT1一抗
椿皮英文名称:Cortex ailanthi保存:20℃,避光规格:2g核糖1,5二羧化酶一抗
铁扫帚英文名称:Iron broom保存:20℃,避光规格:4gRas相关雌激素调节生长抑制蛋白
蒲葵子英文名称:Pu Kuizi保存:20℃,避光规格:2gRAS家族关联结构域蛋白8一抗
广天仙子英文名称:Wide sky Fairy保存:20℃,避光规格:1g肿瘤抑制基因LUCA15一抗
火炭母英文名称:Chinese knotweed保存:20℃,避光规格:2gRAS蛋白样激活剂1一抗
九里香英文名称:Orange Jessamine保存:20℃,避光规格:1gRas相关结构域蛋白质2一抗
板栗壳英文名称:Chestnut shell保存:20℃,避光规格:0.5g抑癌基因PDLIM4一抗
金果榄英文名称:Jin Guolan保存:20℃,避光规格:0.1gRAS抑制蛋白1一抗
菟丝子(南方菟丝子)英文名称:Dodder (Cuscuta australis)保存:20℃,避光规格:0.5g食道癌抑制生长蛋白一抗
臭灵丹英文名称:Laggera pterodonta保存:20℃,避光规格:1gRho家族GTP酶3一抗
山香圆叶英文名称:Turpinia leaf保存:20℃,避光规格:1g环指蛋白139一抗
山橿根英文名称:The root of Lindera reflexa保存:20℃,避光规格:3gRho GTP酶激活蛋白29一抗
槲叶英文名称:Oak leaf保存:20℃,避光规格:0.4g周期素D相关蛋白一抗
路边青英文名称:Roadside green保存:20℃,避光规格:1g视网膜母细胞瘤结合蛋白P48一抗
黑蚂蚁英文名称:The black ant保存:20℃,避光规格:4g视黄醇脱氢酶11/型肝炎核心蛋白一抗
4号染色体开放阅读框27抗体1-(3,4-Dihydroxyphenyl)-7-(4-hydroxyphenyl)hept-6-en-3-ol中文名:别名:分子式:C19H22O4
4号染色体开放阅读框22抗体Piceatannol 3'-O-glucoside中文名:白皮杉醇 3'-O-葡萄糖苷别名:分子式:C20H22O9
4号染色体开放阅读框14抗体Desoxyrhaponticin中文名:脱氧土大黄苷别名:Deoxyrhaponticin分子式:C21H24O8
磷酸化C端结合蛋白1抗体Gancaonin I中文名:甘草宁I别名:分子式:C21H22O5
脊髓灰质炎受体相关蛋白1抗体3,8-Di-O-methylellagic acid 2-O-glucoside中文名:别名:3,3'-Di-O-methylellagic acid 4-O-glucoside分子式:C22H20O13
肌营养不良蛋白抗体 Aspergillus aculeatus种属:Aspergillus aculeatus
分离基物:诺尼果
提供形式:冻干物
安全等级:1
模式菌株:no
培养方法
培养基:综合PDA:20%马铃薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,琼脂 15g,pH 自然。
生长条件:25-28℃,好氧
生长特性在CPDA斜面上产黑色孢子。5-7天
存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法棘孢曲霉