"Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母细胞系
细胞背景资料:骨骼肌;C3H
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母细胞系
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择最合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以最快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个最重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
Vero-76细胞系相关产品:Jurkat Clone E6-1细胞、KMS26细胞、NCIH1694细胞
NCI-H187细胞系相关产品:RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞
WISH细胞系相关产品:OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
MDA-MB-175-VII细胞系相关产品:SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞
NCI-H1155细胞系相关产品:H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
NCIH2227细胞系相关产品:OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞
Adeno-293细胞系相关产品:VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞
Hs940-T细胞系相关产品:NCI-H2228细胞、SNU-886细胞、DMS 79细胞
UMR106细胞系相关产品:TGW-nu细胞、Panc203细胞、Mouse INsulinoma 6细胞
266 Bl细胞系相关产品:GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
KNS62细胞系相关产品:LLC-MK-2细胞、AML12细胞、SKNEP-1细胞
RAW264细胞系相关产品:TYK-nu细胞、CD18细胞、HIEC6细胞
PANC0813细胞系相关产品:293c18细胞、P3/ag细胞、BRL-3A细胞
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母细胞系
H295R-S1细胞系相关产品:AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
UMR106细胞系相关产品:TGW-nu细胞、Panc203细胞、Mouse INsulinoma 6细胞
EM-3细胞系相关产品:WERI-Rb-1细胞、SUP T1细胞、CNE-2细胞
W256细胞系相关产品:HUC细胞、SNU-739细胞、SKMES1细胞
NCM460细胞系相关产品:Metastatic Variant 522细胞、Panc-02细胞、NCI-H774细胞
MC38细胞系相关产品:QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
JTC-28细胞系相关产品:G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品:RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞
UACC-812细胞系相关产品:HT144-mel细胞、CL 1-5细胞、H69C细胞
GT39细胞系相关产品:NCI.H460细胞、RPMI8226细胞、HCC1588细胞
Loucy细胞系相关产品:Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
H676细胞系相关产品:HCC38细胞、SKMES-1细胞、BC-025细胞
Panc-8_13细胞系相关产品:HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞
SUNE 1细胞系相关产品:Buffalo Rat Liver-3A细胞、SUDHL6细胞、GLAG-66细胞
HCC-1419细胞系相关产品:Adeno 293细胞、MCFs细胞、INS-1E细胞
NCI H226细胞系相关产品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC78细胞、BAR-T细胞
HS-294-T细胞系相关产品:HSAEC1-KT细胞、TC-1[JHU-1]细胞、TALL1细胞
COR-L23/P细胞系相关产品:RKO-E6细胞、AtT 20细胞、NALM-6细胞
FDCP1细胞系相关产品:RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
HRIF细胞系相关产品:CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
CAL 85-1细胞系相关产品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、HIBEpiC细胞、SCC-7细胞
HOSEpiC细胞系相关产品:Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞
EA hy 926细胞系相关产品:GM00637B细胞、SUDHL-6细胞、HS-68细胞
LP-1细胞系相关产品:KYSE520细胞、Colon26细胞、HIBEC细胞
OE21细胞系相关产品:NCI-H508细胞、ECV304细胞、H64细胞
Tissue Culture-1细胞系相关产品:CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞
NEC8细胞系相关产品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞
COLO394细胞系相关产品:373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞
NTera2 cl.D1细胞系相关产品:PaTu8988s细胞、253J B-V细胞、CoC1细胞
L6细胞系相关产品:SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞
A 253细胞系相关产品:P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞
PNEC30细胞系相关产品:Ly7细胞、FHC细胞、BCPAP细胞
HPC-Y5细胞系相关产品:GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞
RPMI 1846细胞系相关产品:AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
PC3M细胞系相关产品:BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞
Panc 03.27细胞系相关产品:Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞
AML-EOL-1细胞系相关产品:HSAS1细胞、FAK+/+细胞、NCI-H2009细胞
Ishikawa细胞系相关产品:C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞
Hs 636 T细胞系相关产品:SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞
NCI-H2108细胞系相关产品:COLO 684细胞、D6P2T细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞
TE4细胞系相关产品:RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品:NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
PLCPRF5细胞系相关产品:SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母细胞系
HEK-293-EBNA细胞系相关产品:32Dcl3细胞、Bac 1.2F5细胞、BALB/3T3 clone A31细胞
ACCM细胞系相关产品:Rat Skin 1细胞、143B细胞、SW626细胞
PANC1005细胞系相关产品:H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞
BC-022细胞系相关产品:EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞
KYSE 70细胞系相关产品:REC细胞、MFC细胞、NCI-SNU-C2B细胞
N1S1细胞系相关产品:NTera2 cl.D1细胞、CEMC7细胞、OV2008细胞
WISH细胞系相关产品:OLN 93细胞、HEK293EBNA细胞、HNE3细胞
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