"SKO-007 cell line人多发性骨髓瘤细胞系
细胞背景资料:骨髓瘤;男性
细胞冻存基本方法:1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×10(6)/ml,离心去上清,吸入离心管中。3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SKO-007 cell line人多发性骨髓瘤细胞系
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(最高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:悬浮
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
SKO-007 cell line人多发性骨髓瘤细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
Cattle chondrocytes细胞系相关产品:L5178YR细胞、S37细胞、P3JHR1细胞
H2227细胞系相关产品:ARPE19细胞、TW01细胞、COLO 741细胞
KP-N-YN细胞系相关产品:SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
IPLB-SF 21细胞系相关产品:HITT15细胞、RIN Cl-5F细胞、CLL-CII细胞
Hs840T细胞系相关产品:BTI-Tn5B14细胞、NCI H548细胞、HT-55细胞
High5细胞系相关产品:C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞
hRPTC细胞系相关产品:PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
SW 1116细胞系相关产品:WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞
HCC1954 BL细胞系相关产品:Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞
Hca-F细胞系相关产品:ARO81细胞、RASMCs细胞、SK Mel 2细胞
T9细胞系相关产品:PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞
H-1792细胞系相关产品:Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
SKO-007 cell line人多发性骨髓瘤细胞系
OCI AML3细胞系相关产品:SW 839细胞、MOLP-8细胞、OVISE细胞
C3H10T1/2细胞系相关产品:NCIH1573细胞、PCI-04B细胞、HCEpiC细胞
H-250细胞系相关产品:H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞
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QBI-293A细胞系相关产品:G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞
TW-039细胞系相关产品:RT-4细胞、102PT细胞、GalK 1细胞
HCAEC细胞系相关产品:NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞
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HEK 293FT细胞系相关产品:CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
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SKO-007 cell line人多发性骨髓瘤细胞系
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KP-N-RT细胞系相关产品:NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞
Malme-3M细胞系相关产品:NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
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