"MyLa 2059细胞:人皮肤T淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料:皮肤;T淋巴细胞瘤
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:悬浮
细胞培养实验基本操作:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面;防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行;无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,的优点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系,公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数,为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验,在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护,小心培养,心里都是默默承诺:我要护你一世周全!可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去,投入的不只是我们貌美如花的青春,还有那一去不复返的经费!在细胞生物学,生物化学,免疫学,神经生物学,病理学……只要涉及细胞的研究领域,都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中,也就属支原体最狡猾了,他最善于隐藏自己,因为被支原体污染的细胞不会马上死亡,但会改变细胞的新陈代谢,甚至会改变细胞的基因表达谱,我们就这样被欺骗了无数次,谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来,当你的细胞出现了这些症状时:生长速率改变;活性减弱;形态改变;染色体畸变;转染效率显著降低;细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了,也许你的细胞已经被支原体欺凌了!
细胞培养实验相关问题总结:支原体(mycoplasma)污染的细胞,是否能以肉眼观察出异状?不能。除极有经验之专家外,大多数遭受支原体污染的细胞株,无法以其外观分辨之;支原体污染会对细胞培养有何影响?支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数,代谢及研究之任一数据。故进行实验前,必须确认细胞为mycoplasma-free,实验结果之数据方有意义;侦测出细胞株有支原体污染时,该如何处理?直接灭菌后丢弃,以避免污染其它细胞株;CO2培养箱之水盘如何保持清洁?定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之;为何培养基保存于4°C冰箱中,颜色会偏暗红色,且pH值会越来越偏碱性?培养基保存于4°C冰箱中,培养基内之CO2会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果,将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时,可以通入无菌过滤之CO2,以调整pH值;购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;收到之冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
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