"UT-7细胞:人类原巨核细胞型白血病细胞系
细胞背景资料:该细胞于1988年建系;源于一名64岁患有急性粒细胞白血病(AMLM7)的男性的骨髓;对多种细胞因子有反应。
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞生长:悬浮
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:维持细胞浓度在1.0-1.5×106cells/ml,1:2传代,2-3天1次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:悬浮生长,有1%~2%的细胞可轻微贴壁。
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好。
细胞培养过程中相关问题总结:悬浮性细胞应如何继代处理?一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡;细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因;细胞冷冻培养基之成份为何?动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成;DMSO之等级和无菌过滤之方式为何?冷冻保存使用之DMSO等级,必须为Tissue culture grade之DMSO,其本身即为无菌状况,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于4°C,避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质,并可减少污染之机会。若要过滤DMSO,则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜;冷冻保存细胞之方法?冷冻保存方法一:冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;细胞欲冷冻保存时,细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜;应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法;如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?直接灭菌后丢弃之。
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
GM02132细胞系相关产品:SNU-620细胞、VMM5A细胞、A549ATCC细胞
EFM192C细胞系相关产品:C3H/10T1/2-clone8细胞、LS411N细胞、H3255_DA细胞
PCI-4.2细胞系相关产品:CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞
EBC-1细胞系相关产品:HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞
GTL16细胞系相关产品:NCI-H1184细胞、H-1341细胞、MBVP细胞
PANC3.27细胞系相关产品:BT-B细胞、AU 565细胞、SNGM细胞
HEK293-FT细胞系相关产品:SVEC 4-10细胞、LM2-4175细胞、PL12细胞
GLRK 13细胞系相关产品:IB-RS-2细胞、RCC_7860细胞、67NR细胞
HDQP1细胞系相关产品:Tissue Culture-1细胞、HuP-T4细胞、Ect1/E6E7细胞
Transformed Human Liver Epithelial-2细胞系相关产品:OKT3细胞、MOLM-13细胞、RAW264细胞
NBL-S细胞系相关产品:CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
OLN93细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞
SBC-3细胞系相关产品:HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
YTMLC-90细胞系相关产品:ONS76细胞、CEM.C1细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞
AML-12细胞系相关产品:HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
AML-12细胞系相关产品:HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品:Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞
Nakata-1细胞系相关产品:H2172细胞、JVM-2细胞、NCIADRRES细胞
IA-LM细胞系相关产品:CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞
M14-MEL细胞系相关产品:MDA-MB 361细胞、SW982细胞、CCD-966SK细胞
PLA801-95D细胞系相关产品:SJSA细胞、Panc05.04细胞、MPC 11细胞
Detroit562细胞系相关产品:NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞
CCD-18Co细胞系相关产品:TW 01细胞、NCI-157细胞、A2780 CP70细胞
LY-R细胞系相关产品:EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
CAL27细胞系相关产品:MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞
526mel细胞系相关产品:MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞
NCI-H520细胞系相关产品:Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
MOLT 16细胞系相关产品:R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞
ROS17/2.8细胞系相关产品:WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
WIL2-S细胞系相关产品:COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
SHI1细胞系相关产品:RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞
NSI/1-Ag4-1细胞系相关产品:NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
CAL 12T细胞系相关产品:HOS-TE85细胞、SW-1990细胞、MES-SA/Dx-5细胞
H-2591细胞系相关产品:HTori-3细胞、A549细胞、CCRF CEM细胞
OCI-LY-7细胞系相关产品:HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞
PF-382细胞系相关产品:HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞
SKLMS-1细胞系相关产品:NTERA2D1细胞、ASPC1细胞、16-HBE14o细胞
SW 982细胞系相关产品:Danio rerio Gill细胞、UWB1.289细胞、WERI-Rb 1细胞
Lec1细胞系相关产品:ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
HCV 29细胞系相关产品:Ly19细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、OSRC2细胞
MDA-MB-435-S细胞系相关产品:Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞
Hs863T细胞系相关产品:NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
Ramos.2G6.4C10细胞系相关产品:Hepa1-6细胞、NCI-H1915细胞、GC-1 spg细胞
Panc_02_03细胞系相关产品:OCI-LY-19细胞、HCC1954-BL细胞、KU1919细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品:Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
CLL-CII细胞系相关产品:SW13细胞、H-441细胞、D341Med细胞
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品:NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞
H-2141细胞系相关产品:67NR细胞、TK10细胞、bEND.3细胞
SUP-B1细胞系相关产品:RPMI 7951细胞、Hep-G2细胞、SKLMS1细胞
Swiss/3T3细胞系相关产品:Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞系相关产品:SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
KATOIII细胞系相关产品:NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
MES-23.5细胞系相关产品:P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞
SW-626细胞系相关产品:Malme-3 M细胞、TALL 1细胞、SK-N-BE(2)细胞
MPP 89细胞系相关产品:KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
HEK293S细胞系相关产品:Michigan Cancer Foundation-12A细胞、SUM149PT细胞、LNCaP.FGC细胞
CX-1细胞系相关产品:MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞
SCC9细胞系相关产品:NCI-H2135细胞、CCD-841-CoTr细胞、NIH:OVCAR-10细胞
WIL2-S细胞系相关产品:COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
NFS60细胞系相关产品:HUT-125细胞、PLC PRF 5细胞、P1-Raji细胞
Panc02细胞系相关产品:P815细胞、KTA-7细胞、CHOS细胞
H82细胞系相关产品:FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
LOU-NH91细胞系相关产品:CAL-33细胞、MDA-MB-468细胞、RINm-5F细胞
A431细胞系相关产品:HS688AT细胞、H740细胞、HCC 94细胞
ARIP细胞系相关产品:AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞
QBI-293A细胞系相关产品:G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞
BHK 21细胞系相关产品:NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞
OLN93细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞
H-2029细胞系相关产品:NCTC-929细胞、SV-HUC细胞、EO771细胞
HEK293-A细胞系相关产品:UPCI:SCC154细胞、S3 HeLa细胞、HCC2279细胞
EFM192C细胞系相关产品:C3H/10T1/2-clone8细胞、32D:cl3细胞、NCIH660细胞
253JB-V细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-M17细胞、SKUT-1细胞、M2-10B4细胞
"