C8-D1A细胞：鼠小脑细胞系

"C8-D1A细胞：鼠小脑细胞系
细胞背景资料：该永生化细胞系源自出生８天小鼠小脑组织，由B Pessac, D Trisler建立。该细胞具有小神经胶质细胞特征。该细胞为GFAP阳性细胞，除此之外，没有检测到其它神经胶质神经元或小神经胶质细胞的分子标记。
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁生长
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】１)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌３０min,酒精擦拭后直接开始试验；２)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；３)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；４)不带手套，徒手操作；５)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需１２１°C高压灭菌２０分钟后３７％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
贴壁细胞的消化方法介绍：１、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在０.２５-０.５%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。０.２５%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在３７度条件下，一般消化１-５分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-２０度。２、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在０.０２%左右。作用于细胞与间质，对细胞间也有一定作用。注意，它能显著影响pH值，而且在弱碱性条件下才易溶。因此，配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此，消化下来的细胞要洗一遍。４、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大，但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。５、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。６、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理，我想是因细胞冷冻后收缩，从而从培养瓶上脱落下来。优点是：对细胞损伤小，不需要中止或洗细胞，方便，不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧，又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养，效果非常满意。具体过程是：１、用较多的４度的PBS 洗涤一遍细胞(以６孔板为例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，静置操作台上，很快细胞就小片脱落，３、轻轻吹打，细胞即完全脱落，４、按一定比例传代。
血清必须贮存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将４０～４５ml分装于无菌５０ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约１０%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(５００ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以５０ml无菌离心管可分装４０～４５ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心３０００rpm，５min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在３７℃中欲培养此“微生物”，但在３７℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
RSC-364细胞系相关产品：NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
Hs-746T细胞系相关产品：NOZAWA细胞、CCRF/CEM-C7细胞、EAhy926细胞
BRL 3A细胞系相关产品：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞
P3-X63.Ag8.653细胞系相关产品：MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞
Walker-256细胞系相关产品：AR4-IP细胞、HCC0366细胞、HEL-92_1_7细胞
PA317细胞系相关产品：R 2 C细胞、Panc04.03细胞、H3396细胞
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
Wien-133细胞系相关产品：NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
HSMC细胞系相关产品：NCI-HUT-596细胞、Kasumi-1细胞、NCI-SNU-C2A细胞
HT-1080细胞系相关产品：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞
TKB-1细胞系相关产品：Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞
CATH-a细胞系相关产品：M210B4细胞、HCFB（HCF）细胞、Hs-688A-T细胞
EFM-192C细胞系相关产品：C-33A细胞、MDAPC2B细胞、293-H细胞
G-292, clone A141B1细胞系相关产品：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞
MDAMB435S细胞系相关产品：Caco-2/BBe 1细胞、TOV21细胞、NCI-SNU-520细胞
BHP 10-3细胞系相关产品：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
BHP 10-3细胞系相关产品：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
VMM-5A细胞系相关产品：CC-LP-I细胞、AtT20细胞、PL-9细胞
B-16细胞系相关产品：SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞
My-La 2059细胞系相关产品：U-266 AR1细胞、H345细胞、MIMVEC细胞
HEC1-A细胞系相关产品：C33A细胞、hA549细胞、LAPC-4细胞
H-1734细胞系相关产品：JM-1细胞、3T3NIH细胞、HBL-100细胞
OCI-Ly18细胞系相关产品：HCC9724细胞、C-643细胞、LoVo细胞
Tn5 B1-4细胞系相关产品：CORL51细胞、UCLA-RO 81细胞、B-3细胞
NCIH524细胞系相关产品：SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
U-373MG ATCC细胞系相关产品：IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞
P116细胞系相关产品：MH-22a细胞、DMS 114细胞、CHP 126细胞
IEC18细胞系相关产品：MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
Hs 606细胞系相关产品：L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞
NCI-SNU-620细胞系相关产品：NCI-441细胞、MKN 28细胞、MHCC97-L细胞
NIH:OVCAR-5细胞系相关产品：Ca9-22细胞、HCT-GEO细胞、Hs870T细胞
CORL88细胞系相关产品：H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞
Hk-2细胞系相关产品：B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞
COLO679细胞系相关产品：EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞
CFPAC-1细胞系相关产品：TMK1细胞、ACT-1细胞、JeKo-1细胞
DLM8细胞系相关产品：TFH细胞、U-343细胞、CC-LP-1细胞
BpRc1细胞系相关产品：hTERT-HME1细胞、H1048细胞、IM-9细胞
MDA231细胞系相关产品：JURKAT E-61细胞、Panc813细胞、KU-812细胞
U 266细胞系相关产品：SUDHL-4细胞、AML-EOL-1细胞、HCS-2/8细胞
NCI-H650细胞系相关产品：SK 1细胞、COLO394细胞、Hs 600.T细胞
HUVEC-C[HUVEC]细胞系相关产品：N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
MDA-MB-175-VII细胞系相关产品：SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞
SNGM细胞系相关产品：H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞
NCI-H2135细胞系相关产品：DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
MBVP细胞系相关产品：COLO-16细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、SK-N-DZ细胞
SMA560细胞系相关产品：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞
OCI-Ly 8细胞系相关产品：K562/ADP细胞、MOLT3细胞、MDA-MB-436细胞
HEC-151细胞系相关产品：HepG2-luc细胞、H358细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞
COLO-HSR细胞系相关产品：H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞
NG-108-15细胞系相关产品：TC-1 [Mouse lung]细胞、CL11细胞、BNL CL.2细胞
MonoMac 6细胞系相关产品：MDA-MB-231-luc细胞、LA795细胞、AMC-HN-8细胞
TE11细胞系相关产品：Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
MT-2J细胞系相关产品：SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞系相关产品：NCI-1155细胞、H-2052细胞、Panc05.04细胞
MOLT 3细胞系相关产品：BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
HCC-1143细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
HCC-1143细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
C6661细胞系相关产品：MOLP-8细胞、THLE-3细胞、NS1细胞
SUNE-1细胞系相关产品：D10G41细胞、SCC 15细胞、Hs822T细胞
GM03570E细胞系相关产品：SU-DHL-2细胞、WM-239A细胞、Lu-165细胞
U87 MG细胞系相关产品：F56 [Human neoplasm]细胞、Chinese Hamster Lung细胞、NCI-H929细胞
PLC/PRF5细胞系相关产品：KYSE 510细胞、SUPB15细胞、LC1sq细胞
HLEC-B3细胞系相关产品：MOLT 16细胞、BN-CL2细胞、MTEC1细胞
CF Pac1细胞系相关产品：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞
LIM1215细胞系相关产品：HCC44细胞、HL60细胞、MDAMB468细胞
MDA415细胞系相关产品：H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
PY8119细胞系相关产品：Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞
R1610细胞系相关产品：H510细胞、Murine Thymic Epithelial细胞： 1细胞、HUT 28细胞
H-508细胞系相关产品：LLCPK1细胞、NCIH727细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
Reuber H35细胞系相关产品：TC-1[JHU-1]细胞、SBC-3细胞、MOLT-16细胞
End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、U937细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞
BRL 3A细胞系相关产品：PFSK细胞、HCC366细胞、M210B4细胞
MS-751细胞系相关产品：THP1细胞、MiaPaCa2细胞、NCIH1688细胞
"