抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-BNIP1/TRG8
中文名称 Bcl2相互作用蛋白1抗体(转化相关基因8蛋白)
别 名 NIP1; BCL2 adenovirus E1B 19kD interacting protein 1; BCL2/adenovirus E1B 19 kDa protein-interacting protein 1; BNIP1; sec20; SEC20_HUMAN; SEC20L; Transformation-related gene 8 protein; TRG-8; TRG8; Vesicle transport protein SEC20.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 26kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human BNIP1/TRG8
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
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肽基脯酰异构酶E(PPIE)ELISA Kit for Peptidylprolyl Isomerase E (PPIE)规格:48T/96T
前列腺抑制肽(PIP)ELISA Kit for Prostatic Inhibin Peptide (PIP)规格:48T/96T
肌球蛋白重链1(MYH1)ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult (MYH1)规格:48T/96T
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干扰素ω(IFNω)ELISA Kit for Interferon Omega (IFNw)规格:48T/96T
白介素2受体β(IL2Rβ)ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb)规格:48T/96T
孕受体(PGR)ELISA Kit for Progesterone Receptor (PGR)规格:48T/96T
癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA Kit for Oncoprotein Induced Transcript 3 (OIT3)规格:48T/96T
白介素2受体α(IL2Rα)ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Alpha (IL2Ra)规格:48T/96T
成纤维细胞生长因子10(FGF10)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)规格:48T/96T
芳基硫酸酯酶A抗体Ambocin中文名:染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷别名:Genistein 7-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside分子式:C26H28O14
植物延长蛋白(拟南芥)(-)-Sativan中文名:别名:分子式:C17H18O4
拟南芥ACA11抗体7,3',4'-Tri-O-methyleriodictyol中文名:5-羟基-7,3',4'-三甲氧基二氢黄酮别名:5-Hydroxy-7,3',4'-trimethoxyflavanone分子式:C18H18O6
AHA3抗体(拟南芥)Alpinone 3-acetate中文名:别名:Alpinone 3-O-acetate分子式:C18H16O6
A-Raf抗体Afzelechin 3-O-xyloside中文名:阿夫儿茶精-3-O-木糖苷别名:分子式:C20H22O9
Bcl2相互作用蛋白1抗体(转化相关基因8蛋白) Morchella sp.种属:Morchella sp.
提供形式:斜面培养物/冻干物
安全等级:1
模式菌株:no
应用领域:研究;生产。食用。
培养方法
培养基:综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏水中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。
传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件:25℃,好氧。
生长特性8天长满斜面,菌丝灰白色、稀疏。
存储条件:2-8℃冷藏羊肚菌属(斜面)