丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗

Anti-AKAP12/Gravin

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上海更新日期：2022-09-02

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产品详情:

中文名称：: 丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗

英文名称：: Anti-AKAP12/Gravin

保存条件：: Store at -20 °C

纯度规格：: 1mg/1m

产品类别：: 抗体一抗

抗体反应特点：
1.高度特异性，特异性是抗原抗体反应的最主要特征，特定抗原决定簇只与特定抗体结合；
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为：Ag+AbAg·Ab；
3.适当浓度和比例；
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体 别名 A kinase (PRKA) anchor protein (gravin) 12; A kinase Anchor Protein 12; A kinase anchor protein 250kDa; AKAP 12; AKAP 250; AKAP250; DKFZp686M0430; DKFZp686O0331; Gercelin; Gravin; Kinase scaffold protein gravin; Myasthenia gravis autoantigen gravin; Srcs5; SSeCKS; Tsga12.

浓度 1mg/1ml

规格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗体来源 Rabbit

克隆类型 polyclonal

交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog

产品类型一抗
英文名称 Anti-AKAP12/Gravin

中文名称 丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体

研究领域神经生物学信号转导激酶和磷酸酶

蛋白分子量 predicted molecular weight: 185kDa

性状 Lyophilized or Liquid

免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from the middle of human AKAP12

亚型 IgG

纯化方法 affinity purified by Protein A

储存液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复）
抗体反应的因素：
1.电解质：抗原抗体特异结合后，胶体粒便可发生脱水作用，此时易受电解质影响，如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚，于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
含试剂：
1、一抗（应用：IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ）
2、无色试剂：内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A：封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B：生物素标记二抗工作液：生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C：辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液（白色）20ml
实验步骤：
1、石蜡切片，常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗，pbs 浸泡5 分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。
3、3%双氧水去离子水（无色液体）孵育15-20 分钟，以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20 分钟，倾去，勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
9、滴加试剂C（橙色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
11、显色剂显色（DAB 或AEC）
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要，可进行复染，脱水，透明。
14、选择适当的封片剂封片。
抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。