抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-AQP2
中文名称 水通道蛋白-2抗体
别 名 ADH water channel; AQP 2; AQP CD; AQP2; AQPCD; Aquaporin 2 collecting duct; Aquaporin CD; Aquaporin2; Aquaporine 2; Collecting duct water channel protein; MGC34501; Water channel protein for renal collecting duct; WCH CD; WCHCD; AQP2_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog
产品类型 一抗
研究领域 免疫学 信号转导 通道蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 30kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AQP2.
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
下列是水通道蛋白-2抗体 的相关热销产品:
泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis
昌帕瓦特链霉菌 Streptomyces champavatii
菲律宾游动链霉菌 Actinoplanes philippinensis
东方拟无枝酸菌 Amycolatopsis orientalis
栗褐链霉菌 Streptomyces badius
甲基杆菌 Methylobacterium sp.
秃裸链霉菌 Streptomyces calvus
疮痂病链霉菌 Streptomyces scabies
西唐氏链霉菌 Streptomyces setonii
致泻大肠埃希氏菌 Escherichia coli EPEC O86:K61
葡萄糖半固体发酵管250克Dextrose Semisolid Medium用于志贺氏菌的生化试验
克氏双糖铁琼250克Kilgler Iron Agar细菌复合生化试验
结晶紫中性红胆盐琼250克VRBA用于大肠菌群的检验
SA琼250克Salmonella Arizona Agar亚利桑那沙门氏菌的选择性分离
EVA肉汤250克EVA Broth用于链球菌的增菌培养
赖吲哚动力培养基250克LIM Medium用于链球菌的分离培养;细菌的赖、吲哚和动力复合生化试验
磷盐葡萄糖蛋白胨水培养基250克Phosphate Glucose Peptone Water用于基红试验
KORSER氏柠檬盐肉汤100克Korser Citrate Sodium Broth用于细菌的枸橼盐试验
叠钠葡萄糖肉汤250克Azide Dextrose Broth链球菌、肠球菌、粪链球菌的增菌培养
KF链球菌琼100克KF Streptococcus Agar链球菌的选择性分离和计数
BETA-SSA琼250克BETA-SSA Agar链球菌的选择性分离培养
胰酪胨大豆羊血琼基础250克Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base蜡样芽孢杆菌的溶血测试验
磷酸化内收蛋白a1抗体N-Methylcytisine中文名:N-甲基金雀花碱别名:N-甲基野靛碱分子式:C12H16N2O
磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体Carbazole中文名:咔唑别名:分子式:C12H9N
酸性神经酰胺酶1抗体Voafinidine中文名:别名:分子式:C20H28N2O2
磷酸化肾上腺素能受体β2抗体(β2-AR )Arborine中文名:别名:分子式:C16H14N2O
膜粘连蛋白6抗体Tabernanthine中文名:别名:分子式:C20H26N2O
水通道蛋白-2抗体 Torulopsis│globosa种属:Torulopsis│globosa
提供形式:斜面培养物
安全等级:1
模式菌株:no
应用领域:食用酵母。
培养方法
培养基:CM0077
生长条件:28-30℃
存储条件:定期移植法球拟圆酵母