抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
参数规格:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
英文名称 Anti-ACADL
中文名称 酰基辅酶A脱氢酶长链抗体
别 名 mitochondrial; ACAD4; ACADL; ACADL_HUMAN; Acyl Coenzyme A dehydrogenase long chain; FLJ94052; LCAD; Long chain acyl CoA dehydrogenase; Long-chain specific acyl-CoA dehydrogenase.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 转录调节因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACADL
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
下列是酰基辅酶A脱氢酶长链抗体 的相关热销产品:
棉铃虫拟 Paecilomycesheliothis(Charles)BrownetSmith
皮状丝孢酵母 Trichosporoncutaneum(deBeurmetal.)Ota
贝雷丝孢酵母 TrichosporonbehrendiiLodderetKreger-vanRij
玫烟色拟 Paecilomycesfumosa-roseus(Wize)BrownetSmith
露湿漆斑菌 MyrotheciumroridumTode:Fries
黑球漆斑菌 MyrotheciummelanosporumChen
五通桥毛霉 MucorwutungkiaoFang
产黄纤维单胞菌 Cellulomonas flavigena(Kellerman et McBeth) Bergry et al.
球型芽孢杆菌 BacillussphaericusMeyeretNeide
嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila (chester) Stanier
亮绿琼培养基250克Brilliant Green Agar沙门氏菌分离培养
梭菌培养基250克Clostridium Enrichment Medium用于梭菌增菌培养
安德雷德氏糖类肉汤250克Andrade,s Carbohydrate Broth细菌的糖发酵试验
OF培养基250克HLGB细菌的氧化发酵试验
强化梭菌鉴别琼250克DRCA食品和其他物质中梭菌的计数和培养
强化梭菌培养基250克RCM梭菌的增菌培养和计数
哥伦比亚琼培养基250克Columbia Agar Medium营养要求较高的细菌的培养基及溶血试验,梭菌的检测
哥伦比亚4-基伞形葡糖苷培养基250克Columbia-MUG Medium大肠杆菌的荧光检测
EYA培养基基础250克Egg Yolk Agar Medium Base肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养
250克蜡样芽孢杆菌动力试验
TBB培养基250克Tybobutyricum Broth Base乳酪产品中梭菌的计数
SCHAEDLER厌氧菌琼250克SCHAEDLER Agar厌氧菌的分离培养
肌动蛋白结合蛋白LIM蛋白3抗体Tyramine hydrochloride中文名:酪胺盐酸盐别名:分子式:C8H12NO
磷酸化CD156b抗体Trolline中文名:金莲花碱别名:(±)-Trolline分子式:C12H13NO3
乙醇脱氢酶5抗体5-Carboxystrictosidine中文名:别名:(5S)-5-Carboxystrictosidine分子式:C28H34N2O11
乙醇脱氢酶6抗体4,5-Dihydropiperlonguminine中文名:二氢荜茇明宁碱别名:Dihydropiperlonguminine分子式:C16H21NO3
遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体14-O-Acetylneoline中文名:14-O-乙酰基尼奥宁别名:14-Acetylneoline; Bullatine C分子式:C26H41NO7
酰基辅酶A脱氢酶长链抗体 AspergillusauratusWarcup种属:AspergillusauratusWarcup
安全等级:1
模式菌株:no
培养方法
培养基:13
生长条件:25-28℃鲜橙曲霉