MDCK-II细胞：犬肾细胞系

"MDCK-II细胞：犬肾细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３传代，３-４天传１次
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞培养实验中常见问题总结：１)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞１００X，２００X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过８０%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下１０ml培养液继续培养；超过８０%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、１０００转/分钟离心２分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地２--３天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于４度的，则采用邮寄冻存细胞；３)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；４)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝最后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明：成纤维细胞：来自胎儿传代５０次后衰老死亡，来自成人传代２０次后衰老死亡(与具体年龄有关；来自小鼠传代１４--２８次后衰老死亡，来自乌龟传代９０--１２５次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化，包括：蛋白质合成速度降低，已有蛋白质结构变化，特异蛋白质成份出现;同时，细胞核，线粒体，膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因，尚无定论，出现过好几种理论与假说，其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象，常见的细胞死亡形式有３种：坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中，因为环境因素的突然变化或病原物的入侵，导致一部分细胞死去，称为细胞的病理死亡，或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡；细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件，不依赖于其它两种细胞死亡机理，如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况，一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分；似乎带有“牺牲局部，保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡，明显地受遗传控制，称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡，是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程，无论从形态学、生物学还是生化的特征来说，都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用，在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象，凋亡失控的结果将是可怕的：凋亡不足时，易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病，如老年性痴呆症(Alzheimer""s disease)、帕金森氏症(Parkinson""s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
LM(TK-)细胞系相关产品：HCC0015细胞、373 MG细胞、B/C3T3细胞
SUM-102细胞系相关产品：H-1651细胞、NRK 49F细胞、SKN-AS细胞
SK-ES1细胞系相关产品：HS-5细胞、PSN1细胞、PFSK1细胞
RBE4细胞系相关产品：B95-8细胞、MCF-12F细胞、NCIH522细胞
HTR-8/SV neo细胞系相关产品：BDCM细胞、RMa-bm细胞、NCI-H747细胞
NALM-6细胞系相关产品：RCCJF细胞、NIH:OVCAR3细胞、MCF.7细胞
Porcine Kidney-13细胞系相关产品：H-1048细胞、P3HRI细胞、HPAF II细胞
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞
LS-411N细胞系相关产品：N-87细胞、H1648细胞、MESSA细胞
ATN1细胞系相关产品：NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞
GM346细胞系相关产品：LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
RPMI-8402细胞系相关产品：SuperTube细胞、ABE­8.1/2细胞、HDMEC细胞
SW-954细胞系相关产品：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
NCIH2122细胞系相关产品：LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
NCIH727细胞系相关产品：NCI-N87细胞、TN5B14细胞、SW1573细胞
OCI-AML-5细胞系相关产品：SNU398细胞、16HBE细胞、SK-N-BE(2C)细胞
OUMS-27细胞系相关产品：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
SCC7细胞系相关产品：Douglas Foster-1细胞、ASH3细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞
RC-2细胞系相关产品：HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞
H510细胞系相关产品：OCI-LY-1细胞、BEL7404细胞、IMR-90细胞
OCI AML3细胞系相关产品：SW 839细胞、MOLP-8细胞、OVISE细胞
NCI-1155细胞系相关产品：GM05372细胞、MCF7-GFP细胞、102PT细胞
OVCA8细胞系相关产品：GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞
C-33A细胞系相关产品：NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
D-341细胞系相关产品：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞
BEL-7404细胞系相关产品：CO115细胞、RPMI.8226细胞、High5细胞
HCC1954-BL细胞系相关产品：HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
HCC-1359细胞系相关产品：SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
NH-6细胞系相关产品：SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
Ly18细胞系相关产品：NCIH28细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞
MNNG细胞系相关产品：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
HL 60细胞系相关产品：SW 948细胞、B-104细胞、RERFLCMS细胞
Caki2细胞系相关产品：BE2C细胞、OKT 3细胞、CAL-78细胞
HELA-GFP细胞系相关产品：251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞
OCI-Ly01细胞系相关产品：Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞
H69细胞系相关产品：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞
COLO 320细胞系相关产品：THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞
CCRF-CEM C1细胞系相关产品：HIMEC细胞、FaDu细胞、HCT-GEO细胞
OE19细胞系相关产品：Panc-10.05细胞、BT 20细胞、DH82细胞
NCIH2106细胞系相关产品：GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
HIT T-15细胞系相关产品：CORL23细胞、SGC 7901细胞、SK RC 20细胞
H647细胞系相关产品：DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞
IOSE-29细胞系相关产品：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
ABE­8.1/2细胞系相关产品：Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞
PANC-02-03细胞系相关产品：HEK-293-EBNA细胞、MSTO211H细胞、MeWo细胞
OCIAML3细胞系相关产品：BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞
Rat Lung-65细胞系相关产品：M-07e细胞、OCI Ly3细胞、Mv.1.Lu细胞
SkChA-1细胞系相关产品：CMT93细胞、Human ErythroLeukemia细胞、H-211细胞
OB2细胞系相关产品：Lieming Xu-2细胞、OCI/AML4细胞、A2780细胞
NCI747细胞系相关产品：N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞
NCI-H1563细胞系相关产品：HO-8910PM细胞、U87MG细胞、FHCRC-11细胞
LS174细胞系相关产品：HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
CEMC7细胞系相关产品：HPDLF细胞、Jijoye细胞、H.Ep. #2细胞
CL1.0细胞系相关产品：COR-L 105细胞、M14-MEL细胞、MMAc-Serum Free细胞
SPC-A1细胞系相关产品：H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞
ARIP细胞系相关产品：AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞
NCI-H345细胞系相关产品：MOVAS-1细胞、MAC1细胞、K-1735细胞
BT 20细胞系相关产品：NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞
KM933细胞系相关产品：Psi-2 DAP细胞、SK-Mel1细胞、BT549细胞
SUDHL8细胞系相关产品：OCI Ly19细胞、N1E115细胞、GM05887细胞
H-157细胞系相关产品：U266 B1细胞、NCI-H1876细胞、Panc10.05细胞
VeroE6细胞系相关产品：HANK细胞、SF 767细胞、A-20细胞
RH-35细胞系相关产品：H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞
MKN 45细胞系相关产品：hRPTC细胞、IMR-90细胞、CEM-C7细胞
HME1细胞系相关产品：MC 116细胞、H-1341细胞、SCC-4细胞
SK-ES1细胞系相关产品：HS-5细胞、GM2132细胞、SU-DHL-5细胞
U-2932细胞系相关产品：AA-Mel细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞、2780CP细胞
"