（石蜡切片需做抗原修复）
抗体反应特点：
1.高度特异性，特异性是抗原抗体反应的最主要特征，特定抗原决定簇只与特定抗体结合；
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为：Ag+AbAg·Ab；
3.适当浓度和比例；
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时，化学比色法的敏感度为mg/ml水平，酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml，免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。
抗体反应的因素：
1.电解质 ：抗原抗体特异结合后，胶体粒便可发生脱水作用，此时易受电解质影响，如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚，于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应最适温度。
含试剂：
1、一抗（应用：IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ）
2、无色试剂：内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A：封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B：生物素标记二抗工作液：生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C：辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液（白色）20ml
实验步骤：
1、石蜡切片，常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗，pbs 浸泡5 分钟（如需采用抗原修复，在此步骤后进行）。
3、3%双氧水去离子水（无色液体）孵育15-20 分钟，以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A（蓝色液体）室温孵育15-20 分钟，倾去，勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗，37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
7、滴加试剂B（黄色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
9、滴加试剂C（橙色液体），室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗，3 分钟3 次。
11、显色剂显色（DAB 或AEC）
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要，可进行复染，脱水，透明。
14、选择适当的封片剂封片。
6-CR110 [6-Carboxyrhodamine 110] *Single isomer* 6-羧基罗丹明110（单一化合物） 5 mg
5(6)-CR6G [5-(and 6)-Carboxyrhodamine 6G] *Mixed isomers* 5-(6)-羧基罗丹明6G（混合物） 25 mg
5-CR6G [5-Carboxyrhodamine 6G] *Single isomer* 5-羧基罗丹明6G（单一化合物） 5 mg
6-CR6G [6-Carboxyrhodamine 6G] *Single isomer* 6-羧基罗丹明6G（单一化合物） 5 mg
5(6)-CR6G, SE [5-(and 6)-Carboxyrhodamine 6G, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 5-(6)-羧基罗丹明6G琥珀酰亚胺酯（混合物） 10 mg
5-CR6G, SE [5-Carboxyrhodamine 6G, succinimidyl ester] *Single isomer* 5-羧基罗丹明6G琥珀酰亚胺酯（单一化合物） 5 mg
6-CR6G, SE [6-Carboxyrhodamine 6G, succinimidyl ester] *Single isomer* 6-羧基罗丹明6G琥珀酰亚胺酯（单一化合物） 5 mg
5(6)-CR110, SE [5-(and 6)-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 5-(6)-羧基罗丹明110琥珀酰亚胺酯（混合物） 5 mg
5-CR110, SE [5-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 5-羧基罗丹明110琥珀酰亚胺酯（单一化合物） 5 mg
6-CR110, SE [6-Carboxyrhodamine 110, succinimidyl ester] *Single isomer* 6-羧基罗丹明110琥珀酰亚胺酯（单一化合物） 5 mg
5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 5(6)-羧基四甲基罗丹明（混合物） 100 mg
5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 5(6)-羧基四甲基罗丹明（混合物） 1 g
5(6)-TAMRA [5-(and-6)-Carboxytetramethylrhodamine] *Mixed isomers* 5(6)-羧基四甲基罗丹明（混合物） 5 g
5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 5-羧基四甲基罗丹明（单一化合物） 10 mg
5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 5-羧基四甲基罗丹明（单一化合物） 100 mg
5-TAMRA [5-Carboxytetramethylrhodamine] *Single isomer* 5-羧基四甲基罗丹明（单一化合物） 1 g
CXADR 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
TGF-beta 1 / TGFB1 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
TGF-beta 1 / TGFB1 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
TGF-beta 1 / TGFB1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IP 50 µg
CD10 / Neprilysin / MME 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
TGF-beta 1 / TGFB1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
TGF-beta 1 / TGFB1 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
PAX8 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P IF ICC/IF 50 µg
FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD95 / APO-1 / TNFRSF6 抗體, 鼠單抗 FCM 50 µg
FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µL
CD95 / APO-1 / TNFRSF6 / FAS 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
Complement C1s 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
Complement C1s 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
Leptin / LEP 抗體, 鼠單抗 ELISA WB IF ICC/IF 50 µg
Complement C1s 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
G-CSFR / CD114 / CSF3R 抗體, 鼠單抗 IF ICC/IF 50 µg
G-CSFR / CD114 / CSF3R 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
G-CSFR / CD114 / CSF3R 抗體, 鼠單抗 IF ICC/IF 50 µg
G-CSFR / CD114 / CSF3R 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
G-CSFR / CD114 / CSF3R 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM 25 Test
乙醛脱氢酶家族3成员A1抗体BCAM 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IHC-P IP 50 µg
BCAM / CD239 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
CD40L / CD154 / TNFSF5 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
抗体的鉴定：
1）抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
