NCI-H2286细胞：人肺癌细胞系

"NCI-H2286细胞：人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２-１：４传代；每周换液２次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁生长
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近３００种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题，并不是因为细胞消化最重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
HSC-1细胞系相关产品：293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
PC 61.5.3细胞系相关产品：alpha TC1 clone 6细胞、SK-MEL-MeWo细胞、U-251-MG细胞
AD293细胞系相关产品：T-T细胞、MV4:11细胞、ID8/MOSEC细胞
HPAC细胞系相关产品：JVM-3细胞、H2198细胞、YES2细胞
PC10细胞系相关产品：MIMVEC细胞、BNCL2细胞、NCI-H2106细胞
LNT-229细胞系相关产品：H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
SKUT-1细胞系相关产品：H-498细胞、Kit225细胞、Ra #1细胞
Panc 05.04细胞系相关产品：KMST6细胞、CMEC/D3细胞、NUGC-4细胞
H2405细胞系相关产品：BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
HPAF/CD18细胞系相关产品：MUS-M1细胞、PANC 813细胞、BSC-40细胞
HCC-15细胞系相关产品：MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞
CAL 39细胞系相关产品：MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
T HEECs细胞系相关产品：N1E-115细胞、NALM 6细胞、SHG-44细胞
H250细胞系相关产品：VM-CUB1细胞、RERF-LC-MS细胞、NU-GC-2细胞
MG-63细胞系相关产品：TEV-1细胞、NRK-52E细胞、FK81细胞
YT细胞系相关产品：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞
YT细胞系相关产品：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞
MyLa2059细胞系相关产品：SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞
KU-812-F细胞系相关产品：SEM细胞、Mevo细胞、OCIAML2细胞
KLN205细胞系相关产品：HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
H920细胞系相关产品：HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
H508细胞系相关产品：ADR-RES细胞、U 138 MG细胞、H-1819细胞
EAC-E2G8细胞系相关产品：OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞
MDA415细胞系相关产品：H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
U266B1细胞系相关产品：OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞
526mel细胞系相关产品：MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞
Porcine Kidney-15细胞系相关产品：PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
CNE-2细胞系相关产品：HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞
IPLB-Sf21-AE细胞系相关产品：SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞
HIBEpiC细胞系相关产品：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞
H2029细胞系相关产品：CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞
MDA-MB-361细胞系相关产品：LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞
QGY7701细胞系相关产品：U343细胞、CX1细胞、AM细胞
B16BL-6细胞系相关产品：MMQ细胞、Ca 9-22细胞、H1755细胞
LNCaP-ATCC细胞系相关产品：MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞
BE(2)C细胞系相关产品：SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞
MDA-MB-435 S细胞系相关产品：MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞
Vero E-6细胞系相关产品：OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞
NCIH82细胞系相关产品：HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
870细胞系相关产品：H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞
OV1063细胞系相关产品：KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞
HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
SW1116细胞系相关产品：KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
PLA801D细胞系相关产品：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
KYSE0030细胞系相关产品：hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞
Farage细胞系相关产品：NRK clone 52E细胞、NTera2/D1细胞、H-1522细胞
HBL-100细胞系相关产品：NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞
NB1RGB细胞系相关产品：SK-MEL-2-LUC细胞、H-1819细胞、SHIN-3细胞
Swiss/3T3细胞系相关产品：Human Fetal Thymocyte-8810细胞、LL/2 (LLC1)细胞、NCI-H2085细胞
OEC33细胞系相关产品：ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞系相关产品：GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
OUMS-23细胞系相关产品：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
P-2003细胞系相关产品：SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞
RFL6细胞系相关产品：HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
COV504细胞系相关产品：H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
BMDC细胞系相关产品：KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
OCI-Ly3细胞系相关产品：C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
T2 (174 x CEM.T2)细胞系相关产品：Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞
HEK-293-H细胞系相关产品：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞
Scott and White No. 13细胞系相关产品：NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞
624-mel细胞系相关产品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、aNK细胞、NUGC-2细胞
MDA-MB-453细胞系相关产品：H-2444细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞、HS-729细胞
HT 144细胞系相关产品：CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
NT2细胞系相关产品：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞
NCI-N87细胞系相关产品：NRK细胞、NCI-H2196细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞
MNNG细胞系相关产品：I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
SW756细胞系相关产品：UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞
RD-2细胞系相关产品：Hs 675.T细胞、MDA453细胞、MES-13细胞
WM266细胞系相关产品：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
WM266细胞系相关产品：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
HCoEpiC细胞系相关产品：P36细胞、HSF细胞、PZ-HPV-7细胞
HuPT4细胞系相关产品：MC-38细胞、CEM-0细胞、Panc 04.03细胞
AD293细胞系相关产品：T-T细胞、B16/BL6细胞、COLO 829细胞
P3J.HR1K细胞系相关产品：LAN1细胞、H-2066细胞、NTera-2D1细胞
"