Calu-1细胞：人肺腺癌细胞系

"Calu-1细胞：人肺腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化１０分钟。１：２。３-４天长满
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁生长
接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T２５及离心管发货的细胞将可以消毒后在３７度过夜，血清发货的细胞在室温下静置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T２５瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T２５瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(１２００rpm，５min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(１０００rpm，３min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。
BHK 21细胞系相关产品：NBL-1细胞、LLC细胞、HUVEC细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品：CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
HuLEC-5a细胞系相关产品：AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
NB-19细胞系相关产品：HREC细胞、PGLH7细胞、F98细胞
NT2D1细胞系相关产品：GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞
D-283 Med细胞系相关产品：KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞
CAL-33细胞系相关产品：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
PLA801D细胞系相关产品：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
A-375细胞系相关产品：H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
FCCH1018细胞系相关产品：VP 229细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞、EFM-192C细胞
High Five细胞系相关产品：KLN-205细胞、SW-48细胞、D-341细胞
Japanese Tissue Culture-39细胞系相关产品：HCT-8细胞、Human Embryo Lung-1细胞、LLC-PK(1)细胞
HCC-4006细胞系相关产品：SNU869细胞、H-841细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞
BSC1细胞系相关产品：Granta-519细胞、SNU-119细胞、H69/P细胞
NCI-H-82细胞系相关产品：BMDC细胞、HOS-TE85细胞、M619细胞
U-CH1细胞系相关产品：CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
U-CH1细胞系相关产品：CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
Hs 274.T细胞系相关产品：KU.812细胞、HECV细胞、NCIH23细胞
Hs 737.T细胞系相关产品：293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
KYSE450细胞系相关产品：NALM 6细胞、HEK293FT细胞、KMBC细胞
N1S1细胞系相关产品：NTera2 cl.D1细胞、373MG细胞、RCF细胞
H 9细胞系相关产品：Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、BE(2)C细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞
EM-3细胞系相关产品：WERI-Rb-1细胞、SUP T1细胞、CNE-2细胞
Vx2细胞系相关产品：697细胞、NCIH2196细胞、Psi-2 DAP细胞
L-6细胞系相关产品：L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
SK-N-BE(2)C细胞系相关产品：MDA-MB157细胞、NCI-H64细胞、J-111细胞
High Five细胞系相关产品：KLN-205细胞、SW-48细胞、D-341细胞
Hela-Ap-1细胞系相关产品：LC-2/ad细胞、HSKMC细胞、MKN1细胞
RIN-m 14B细胞系相关产品：SW-1783细胞、SHG44细胞、SupB15W细胞
FHs74 Int细胞系相关产品：HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞
SK-N-MC细胞系相关产品：Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
HO8910细胞系相关产品：HEC-1B细胞、HBZY 1细胞、H-2330细胞
Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞
L02细胞系相关产品：NCI-H1651细胞、NCI-H1435细胞、B958细胞
SKOV-433细胞系相关产品：H1703细胞、Hs 729.T细胞、MC-26细胞
NCI-H1648细胞系相关产品：CT26-clone 25细胞、UPCI:SCC154细胞、MSTO-211H细胞
Roswell Park Memorial Institute 1846细胞系相关产品：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞
kms 11细胞系相关产品：Hopkins-92细胞、293-EBNA1细胞、H-1155细胞
PLA-801C细胞系相关产品：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞
MC 3T3-E1细胞系相关产品：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞
Ku812F细胞系相关产品：159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
U138MG细胞系相关产品：HT3细胞、Y3.AG.1.2.3细胞、MSTO-211 H细胞
hTERT-HME-1细胞系相关产品：293-EBNA细胞、HGF-1细胞、KOPN-8细胞
HCC1187细胞系相关产品：ARIP细胞、BNL.CL2细胞、MM6细胞
CAL851细胞系相关产品：CPA 47细胞、SNU216细胞、hTERT-RPE-1细胞
KBM7细胞系相关产品：C3A细胞、MDA-MB-231-luc细胞、HS-766-T细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品：MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
HEC1B细胞系相关产品：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
CO115细胞系相关产品：SK.MEL.5细胞、PECAPJ34细胞、MADB-106细胞
ME 180细胞系相关产品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、RD 2细胞、IR 983F细胞
LNCaP.FGC细胞系相关产品：NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
DHL-8细胞系相关产品：NS-1细胞、CAL-51细胞、PTK 2细胞
SK-MES细胞系相关产品：624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞
NCIH2029细胞系相关产品：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
LNCaP-FGC细胞系相关产品：CORL26细胞、NCI-H250细胞、RA 1细胞
H-865细胞系相关产品：Huh-7.5细胞、A20细胞、SKES-1细胞
LIM 1215细胞系相关产品：U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品：LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞
WIL2S细胞系相关产品：TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞
CaES-17细胞系相关产品：MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
P3-X63.Ag8.653细胞系相关产品：MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞
NTera 2/cl.D1细胞系相关产品：H-1155细胞、OVCAR432细胞、ssMCF-7细胞
EAhy 926细胞系相关产品：SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
BIC细胞系相关产品：NCI-H1563细胞、Adeno 293细胞、Panc-3_27细胞
EOMA细胞系相关产品：P3/NSI/1-AG4-1细胞、OB2细胞、H-548细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品：OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
SUDHL-16细胞系相关产品：F-81细胞、Porcine Kidney-13细胞、NCIH1781细胞
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞
OS-732细胞系相关产品：6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞
SNU387细胞系相关产品：3T3L1细胞、P3X63 AG8-653细胞、PLA802细胞
Colon 26细胞系相关产品：Jiyoye (P-2003)细胞、Hs 832(C).T细胞、Neukoplast细胞
Huh-7细胞系相关产品：MCM细胞、HS-940-T细胞、ACT-1细胞
SKMEL5细胞系相关产品：JB6 clone 30, subclone 7b细胞、OAW42细胞、Ly3细胞
"