RKO细胞：人结肠癌细胞系

"RKO细胞：人结肠癌细胞系
细胞背景资料：RKO是一个低分化的结肠癌细胞系。RKO细胞含有野生型P５３，但缺乏人甲状腺受体核受体(h-TRbeta１)。RKO细胞的P５３蛋白的水平高于RKO-E６细胞。RKO细胞系是RKO-E６和RKO-AS４５-１的亲本细胞系。该细胞系在裸鼠中成瘤，且在软琼脂中形成集落。
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性：贴壁生长
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。
SiHa细胞系相关产品：SW 620细胞、HCT8细胞、A.704细胞
Pt-K2细胞系相关产品：MDA 231-LM2-4175细胞、HFT-8810细胞、HKF细胞
NUGC3细胞系相关产品：VMRC-RCZ细胞、SU-DHL6细胞、16-HBEo细胞
BJAB-1细胞系相关产品：SF767细胞、SkMel31细胞、Hs739T细胞
HCC0078细胞系相关产品：HT144细胞、OVCAR-4细胞、HRCEC细胞
Epstein-Barr-3细胞系相关产品：SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞
B16 F1细胞系相关产品：JROECL33细胞、H-1703细胞、LC-MS细胞
CA-46细胞系相关产品：B-95-8细胞、Daoy细胞、9L细胞
Hs 729.T细胞系相关产品：H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞
NCIH2023细胞系相关产品：CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞
BMDC细胞系相关产品：KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
EJ 138细胞系相关产品：IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞
SK-MEL24细胞系相关产品：IGROV 1细胞、EFM192B细胞、COLO-1细胞
WB-F344细胞系相关产品：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞
L-M[TK-]细胞系相关产品：FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞
L-M[TK-]细胞系相关产品：FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞
Colo699细胞系相关产品：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞
SNU-5细胞系相关产品：SKLU01细胞、HCT_116细胞、KYSE-50细胞
B 95-8细胞系相关产品：DHL-4细胞、HR8348细胞、OCI-Ly 8细胞
NCI-H1954细胞系相关产品：TE13细胞、HUT-226细胞、PCI:SG-231细胞
RH8994细胞系相关产品：SVGp12细胞、Opossum Kidney细胞、NCI-H3255细胞
Detroit-562细胞系相关产品：T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
MRC 5细胞系相关产品：BE2-C细胞、PE CA PJ34细胞、RC-4B细胞
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞
TE1细胞系相关产品：H-2228细胞、COLO-320HSR细胞、Med 341细胞
OV2008细胞系相关产品：NS1-Ag4/1细胞、HRC-99细胞、NCI-H727细胞
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
SCC154细胞系相关产品：Plaepi 34细胞、VM-CUB1细胞、BHT101细胞
BC-023细胞系相关产品：PL5细胞、COLO320HSR细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞
IPLB-SF 21细胞系相关产品：HITT15细胞、RIN Cl-5F细胞、CLL-CII细胞
IMR 32细胞系相关产品：RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞
SKML-28细胞系相关产品：CT26.CL25细胞、TE32细胞、PG13细胞
SCC 15细胞系相关产品：VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞
M1细胞系相关产品：VM-CUB-1细胞、COLO-320细胞、MDA-MB-435S细胞
SVEC4-10细胞系相关产品：Hx147细胞、CORL88细胞、Hs 729.T细胞
H-35细胞系相关产品：KP 4细胞、SUDHL2细胞、BSC1细胞
TFH细胞系相关产品：RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞
MDA-MB-175-VII细胞系相关产品：SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞
OK细胞系相关产品：Y3-Ag123细胞、C-8161细胞、KU 812细胞
UCH1细胞系相关产品：HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞
LADMAC细胞系相关产品：TO175T细胞、MRC 5细胞、FHCRC subclone 11细胞
HEK 293 EBNA细胞系相关产品：Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞
CAL-148细胞系相关产品：253J-Bladder-V细胞、T-47-D细胞、COLO680N细胞
Jiyoye细胞系相关产品：ABC-1细胞、LNCaP C4-2细胞、3AO细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品：NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
NWA细胞系相关产品：NCI H2106细胞、OCI AML3细胞、Natural Killer-92细胞
Hs445细胞系相关产品：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞
RAW264.7细胞系相关产品：SK MEL 5细胞、U-266细胞、Panc02-H0细胞
SW1116细胞系相关产品：KYSE0520细胞、HT-1197细胞、NCI-H719细胞
SU-DHL6细胞系相关产品：HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞
R D细胞系相关产品：CAL 120细胞、MDA-MB-175VII细胞、SUM 149细胞
LTEP a2细胞系相关产品：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞
PT-K75细胞系相关产品：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品：OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
THLE-2细胞系相关产品：TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、EBC-1细胞、NPC-TW039细胞
SB细胞系相关产品：SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞
MB49细胞系相关产品：HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞
NCIH2030细胞系相关产品：DoHH-2细胞、RH-30细胞、GP2-293细胞
MHCC97-L细胞系相关产品：SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞
SW13细胞系相关产品：NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞
RC-K8细胞系相关产品：HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
WEHI 3B细胞系相关产品：Tca-8113细胞、4T1.2细胞、Nb2-11细胞
HEK-293 c18细胞系相关产品：brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞
ANA1细胞系相关产品：C-127细胞、KBM7细胞、H-2081细胞
Panc 2.03细胞系相关产品：CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞
Madison细胞系相关产品：RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞
USMC细胞系相关产品：UT7细胞、Hs 840.T细胞、HEK-293-F细胞
PC-3M-2B4细胞系相关产品：GBC-SD细胞、NCI-SNU-C2A细胞、MDA415细胞
Panc 03.27细胞系相关产品：Scott细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、Ball 1细胞
NUGC3细胞系相关产品：VMRC-RCZ细胞、A549/DDP细胞、2008细胞
HCM细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、FDCP-1细胞、JHH-7细胞
"