Wien 133 人非何杰金氏淋巴瘤细胞系

"Wien 133 人非何杰金氏淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：淋巴母细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Wien 133 人非何杰金氏淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
Wien 133 人非何杰金氏淋巴瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
ETCC-007细胞系相关产品：HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞 
PT-K75细胞系相关产品：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞 
MV4;11细胞系相关产品：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞 
TF1细胞系相关产品：NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞 
MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞 
P3X63 Ag8细胞系相关产品：H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞 
MSTO211H细胞系相关产品：NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞 
N87细胞系相关产品：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞 
MDAMB330细胞系相关产品：Sarcoma OSteogenic-2细胞、OsA-CL细胞、MADISON LUNG TA-109细胞 
NE1细胞系相关产品：LS 180细胞、OV-2008细胞、MEC-1细胞 
HEL-92_1_7细胞系相关产品：SKG-IIIa细胞、H4-IIE-C3细胞、NCI H226细胞 
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞 
CX-1细胞系相关产品：MIA-Pa-Ca-2细胞、BV-2细胞、GM03320细胞 
CCRF-SB细胞系相关产品：RT-BM 1细胞、NS1-1 Ag4.1细胞、C12细胞 
SKES1细胞系相关产品：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞 
HCE细胞系相关产品：HEC-1-A细胞、SMA560细胞、LUDLU-1细胞 
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RAW-264.7细胞系相关产品：HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞 
ROS 17/28细胞系相关产品：A-427细胞、BpRcl细胞、Ly19细胞 
MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞 
Wien 133 人非何杰金氏淋巴瘤细胞系
NCIH650细胞系相关产品：K7M2 wt细胞、T 24细胞、MDA-361细胞 
OVCAR.4细胞系相关产品：CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞 
H35细胞系相关产品：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞 
PIGI细胞系相关产品：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞 
ROS17/2.8细胞系相关产品：WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞 
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞 
Saos2细胞系相关产品：BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞 
HT 1376细胞系相关产品：PG-4(S+L-)细胞、Panc-327细胞、NCIH1993细胞 
RM1细胞系相关产品：NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞 
WM-266-mel细胞系相关产品：H2066细胞、SK-RC-39细胞、SPC-A1细胞 
PL45细胞系相关产品：4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞 
H-35 Reuber细胞系相关产品：COLO 394细胞、SHSY5Y细胞、HCC1569细胞 
BT 325细胞系相关产品：BCaP-37细胞、KNS-62细胞、DU-4475细胞 
786-O RCC细胞系相关产品：SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞 
R 1610细胞系相关产品：E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞 
SCC9细胞系相关产品：NCI-H2135细胞、CCD-841-CoTr细胞、NIH:OVCAR-10细胞 
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JM-Jurkat细胞系相关产品：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞 
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HEK 293 EBNA细胞系相关产品：Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞 
JHH-7细胞系相关产品：GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞 
CHP 100细胞系相关产品：PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞 
HGMC细胞系相关产品：MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞 
A2780细胞系相关产品：RMG1细胞、Sf21细胞、CCD 841 CoTr细胞 
HCC-2108细胞系相关产品：Human Embryonic Skin细胞、N-9细胞、KYSE-520细胞 
TE6细胞系相关产品：MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞 
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PL5细胞系相关产品：PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞 
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SK-MEL2细胞系相关产品：COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞 
HIT细胞系相关产品：SUM-52细胞、PLA801C细胞、MEL-526细胞 
NB1-RGB细胞系相关产品：D10.G4.1细胞、SW 1116细胞、C-4 I细胞 
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LOU-NH-91细胞系相关产品：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞 
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SK MES 1细胞系相关产品：OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞 
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞 
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Ca 9-22细胞系相关产品：Caco-2 BBe细胞、EOL1细胞、KMH-2细胞 
MV4;11细胞系相关产品：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、CEM.C1细胞、L 428细胞 
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