KM932 人B淋巴细胞系

"KM932 人B淋巴细胞系
细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转化 
细胞形态：淋巴母细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KM932 人B淋巴细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
KM932 人B淋巴细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
IOSE29细胞系相关产品：C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞 
M-NFS-60细胞系相关产品：ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞 
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞系相关产品：MC/CAR细胞、HEM-L细胞、HuH6细胞 
Clone 166细胞系相关产品：CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞 
MG-HU-3细胞系相关产品：TE-32细胞、CCD-1112sk细胞、LTEPa2细胞 
HuTu 80细胞系相关产品：BT483细胞、MPC-83细胞、Nakata-1细胞 
NCIH1944细胞系相关产品：KMM1细胞、H295R-S1细胞、HCC9204细胞 
RPMI1788细胞系相关产品：NCI-H1436细胞、UM-UC14细胞、NCI-H1436细胞 
HuH28细胞系相关产品：IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞 
BTT739细胞系相关产品：U-937细胞、H1869细胞、My-La 2059细胞 
SK-LMS-1细胞系相关产品：HNE1细胞、MDCC-MSB-1细胞、NCI-SNU-1细胞 
FHCRC-11细胞系相关产品：Metastatic Variant-522细胞、SupT1细胞、NCI-H2227细胞 
J-82细胞系相关产品：293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞 
PLA-802细胞系相关产品：BC-025细胞、H1930细胞、SK-ChA1细胞 
HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品：JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞 
H-889细胞系相关产品：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞 
H-889细胞系相关产品：NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞 
NCIH548细胞系相关产品：COLO 679细胞、HGC27细胞、NCI-H838细胞 
PIG3细胞系相关产品：HT 29细胞、786-O RCC细胞、JURKAT E-61细胞 
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞 
KM932 人B淋巴细胞系
AR4-IP细胞系相关产品：S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞 
SNU-878细胞系相关产品：HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞 
KMS11细胞系相关产品：B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞 
AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞 
HEK 293细胞系相关产品：WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞 
HL-60 Clone 15细胞系相关产品：HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞 
Glioma-261细胞系相关产品：BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞 
SCI1细胞系相关产品：HC11 Mammary Epithelium细胞、SK-NSH细胞、PIGI细胞 
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Me-Wo细胞系相关产品：CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞 
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H-7721细胞系相关产品：TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞 
SUPM2细胞系相关产品：GM05887A细胞、JAR细胞、Tu177细胞 
L6565细胞系相关产品：GM00637F细胞、MB157细胞、DU145细胞 
COLO-738细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞 
Psi2-DAP细胞系相关产品：Ca759细胞、UACC812细胞、TC-1[JHU-1]细胞 
SU86_86细胞系相关产品：HFL-I细胞、Melan-a细胞、L-Wnt3A细胞 
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PAMC82细胞系相关产品：mousepodocyte细胞、RIN14B细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞 
KBM7细胞系相关产品：C3A细胞、MDA-MB-231-luc细胞、HS-766-T细胞 
SK-HEP-1细胞系相关产品：SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞 
GM0637细胞系相关产品：SUM149细胞、TOV112D细胞、Leukemic 1210细胞 
Clone Y-1细胞系相关产品：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞 
NS653细胞系相关产品：H1869细胞、LAPC-4细胞、PLA-802细胞 
TSU-Pr1细胞系相关产品：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞 
H766T细胞系相关产品：Hs27细胞、EAHY-926细胞、Y3Ag1.2.3细胞 
NTera2 cl.D1细胞系相关产品：PaTu8988s细胞、253J B-V细胞、CoC1细胞 
AN-3细胞系相关产品：U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞 
JKT1细胞系相关产品：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞 
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞 
HCEC-B4G12细胞系相关产品：AX-Mel细胞、MNNG细胞、H-1975细胞 
KM932 人B淋巴细胞系
NE1细胞系相关产品：LS 180细胞、OV-2008细胞、MEC-1细胞 
MDA-MB-175细胞系相关产品：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞 
NCIH2081细胞系相关产品：74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞 
CEM-CCRF (CAMR)细胞系相关产品：H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞 
ACC-M细胞系相关产品：MCF10-A细胞、NFS60细胞、HN13细胞 
NCI-H735细胞系相关产品：OVCA433细胞、MES-SA Dx5细胞、OsACL细胞 
HEK-293-H细胞系相关产品：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞 
SU-86-86细胞系相关产品：HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞 
Verda reno细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、H9c2(2-1)细胞、KG1A细胞 
SNU-354细胞系相关产品：SK RC 20细胞、HemECs细胞、KTA-7细胞 
MKN 7细胞系相关产品：MCAEC细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MC-3T3-E1细胞 
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞系相关产品：MC/CAR细胞、A-253细胞、FAT细胞 
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