EU-4 人急性髓系白血病细胞系

"EU-4 人急性髓系白血病细胞系
细胞背景资料：儿童急性髓系白血病 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
EU-4 人急性髓系白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
EU-4 人急性髓系白血病细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CSQT-2细胞系相关产品：Blotchy fibroblast-11细胞、COR-L88细胞、BT-474细胞 
293T/17细胞系相关产品：SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞 
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞 
Neuro-2a细胞系相关产品：HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞 
SNU869细胞系相关产品：Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、MNNG/HOS细胞、A2780CP70细胞 
TH1细胞系相关产品：A9(Hamprecht)细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、SC1细胞 
Walker 256细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、GBC-SD细胞、BHP 10-3细胞 
CEM.C1细胞系相关产品：10RGB细胞、NCIH23细胞、MN-9D细胞 
Clone Y1细胞系相关产品：COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞 
MC 3T3-E1细胞系相关产品：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞 
Daudi细胞系相关产品：SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞 
H-9细胞系相关产品：NCI-H1648细胞、NALM6细胞、H4IIE细胞 
NCI-H2405细胞系相关产品：MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞 
SU-DHL-10细胞系相关产品：BC-020细胞、Rat-2细胞、NCIH2170细胞 
C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞 
MDA231-LM2细胞系相关产品：NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞 
RKOAS451细胞系相关产品：T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞 
MIMVEC细胞系相关产品：A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞 
TE6细胞系相关产品：MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞 
Centre Antoine Lacassagne-78细胞系相关产品：H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞 
EU-4 人急性髓系白血病细胞系
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞 
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞 
H-661细胞系相关产品：PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞 
LC-1 sq细胞系相关产品：CEM/C1细胞、NCI-H1618细胞、Bac1 2F5细胞 
MDA-MB-175-VII细胞系相关产品：SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞 
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品：H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞 
PL5细胞系相关产品：PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞 
U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞 
OKT 3细胞系相关产品：SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞 
T/G HA VSMC细胞系相关产品：10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞 
Mink Lung细胞系相关产品：NCI-H1915细胞、HCC-44细胞、LNCaP clone FGC细胞 
KRC/Y细胞系相关产品：VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞 
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞 
MFHL-2细胞系相关产品：Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞 
H460细胞系相关产品：Karpas 299细胞、87MG细胞、MA 104细胞 
HEK 293 EBNA细胞系相关产品：Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞 
NUGC-3细胞系相关产品：H-735细胞、MOLT 16细胞、HTR-8/SV neo细胞 
Sc-1细胞系相关产品：RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞 
EBNA-293细胞系相关产品：SKNBE(1)细胞、QBC(939)细胞、GP5d细胞 
COLO320/DM细胞系相关产品：Pro-Lec1.3C细胞、Jurkat-FHCRC细胞、GOTO细胞 
YES2细胞系相关产品：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞 
Me Wo细胞系相关产品：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞 
BSC40细胞系相关产品：J 82细胞、HCC-1599细胞、751-NA细胞 
SK-Mel1细胞系相关产品：PC-3M-2B4细胞、OVCAR-433细胞、Ketr3细胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞 
H1755细胞系相关产品：Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞 
U-87 MG细胞系相关产品：LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞 
MDA1386细胞系相关产品：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞 
hEEC细胞系相关产品：Pa017C细胞、A-2780细胞、MM.1S细胞 
SK.MEL.2细胞系相关产品：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞 
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞 
HUV-EC-C细胞系相关产品：B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞 
TEV-1细胞系相关产品：4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞 
SL-1细胞系相关产品：C22 (Clara)细胞、H-2342细胞、HBL100细胞 
C-33 A细胞系相关产品：ST2细胞、KRC-Y细胞、VP 229细胞 
NRK clone 49F细胞系相关产品：H322T细胞、OVCA-420细胞、OE21细胞 
JVM2细胞系相关产品：YES-2细胞、MES-SA/Dx-5细胞、SKHEP1细胞 
HEL-92-1-7细胞系相关产品：HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞 
KTCTL140细胞系相关产品：H-2009细胞、Evsa-T细胞、COLO 678细胞 
HUCEC细胞系相关产品：RKO细胞、SUD-4细胞、HT-29/CX-1细胞 
IBRS-2细胞系相关产品：Lewis Lung Cancer细胞、OV2008细胞、NCIH1092细胞 
EU-4 人急性髓系白血病细胞系
PaTu 8988 S细胞系相关产品：Panc 02细胞、PLC细胞、NCTC clone 929细胞 
PNT1A细胞系相关产品：RPE-1细胞、HCCLM6细胞、HLEC-SRA 01/04细胞 
AE 1201细胞系相关产品：Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞 
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞 
BL-6细胞系相关产品：CAL62细胞、Hs729细胞、HemECs细胞 
KU.812细胞系相关产品：J-774A.1细胞、Hi-five细胞、HEK-293-H细胞 
LC-1细胞系相关产品：NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞 
NCI-H1341细胞系相关产品：SNU-407细胞、Case 3细胞、Dysplastic Oral Keratinocyte细胞 
NCI-H23细胞系相关产品：HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞 
SK-ChA1细胞系相关产品：Sc-1细胞、Large Cell Lung Cancer-103H细胞、MZCRC1细胞 
MDA-MB-415细胞系相关产品：NCI.H23细胞、B16-BL6细胞、SF767细胞 
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、FDC-P1细胞 
"