WSU-DLCL2 人弥漫大B淋巴瘤细胞系

"WSU-DLCL2 人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：弥漫大B淋巴瘤；男性 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
WSU-DLCL2 人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
WSU-DLCL2 人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCIH1573细胞系相关产品：CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞 
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞 
ECC-12细胞系相关产品：RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞系相关产品：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞 
F442-A细胞系相关产品：MOLT-16细胞、DH 82细胞、UCLA-SO-M14细胞 
COLO206F细胞系相关产品：TC7细胞、INS1细胞、MonoMac6细胞 
COLO 678细胞系相关产品：OVCA-432细胞、NCIH295R细胞、Panc-1-P细胞 
B6Tert-1细胞系相关产品：CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞 
WM-239细胞系相关产品：C8D1A细胞、Kit 225-K6细胞、2PK3细胞 
U-251_MG细胞系相关产品：SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞 
H1770细胞系相关产品：H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞 
SR细胞系相关产品：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞 
P-2003细胞系相关产品：SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞 
U251n细胞系相关产品：IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞 
SUPB15细胞系相关产品：SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞 
NCI-H1618细胞系相关产品：3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞 
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BC-3H-1细胞系相关产品：H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞 
HTori3细胞系相关产品：GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞 
HKC细胞系相关产品：SW-982细胞、PL9细胞、BL1339细胞 
WSU-DLCL2 人弥漫大B淋巴瘤细胞系
GM03570细胞系相关产品：Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞 
SW-403细胞系相关产品：TF-1a细胞、HSC5细胞、Lewis-Lung细胞 
NCIH187细胞系相关产品：J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞 
HEK-AD 293细胞系相关产品：H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞 
NCIH1385细胞系相关产品：P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞 
LS411细胞系相关产品：H-2195细胞、NCI-H1668细胞、HCC1954细胞 
SHEP1细胞系相关产品：SKRC-39细胞、Panc-08.13细胞、Hs940T细胞 
NCI-SNU-1040细胞系相关产品：DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞 
KP-N-YN细胞系相关产品：SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞 
Panc 08.13细胞系相关产品：AZ 521细胞、HKF细胞、HSAS1细胞 
NCIH446细胞系相关产品：Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞 
RDES-1细胞系相关产品：HuT 78细胞、U-373-MG细胞、C-Lu-65细胞 
M14-MEL细胞系相关产品：MDA-MB 361细胞、SW982细胞、CCD-966SK细胞 
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞 
253J-BV细胞系相关产品：VK2/E6E7细胞、RPE-1细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞 
4-1st细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞 
CCRF SB细胞系相关产品：H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞 
Fetal Bovine Heart Endothelial细胞系相关产品：HT22细胞、U 266细胞、PLCPRF5细胞 
ARH-77细胞系相关产品：RFL-6细胞、NCI-N87细胞、HEK/EBNA细胞 
GM0637细胞系相关产品：SUM149细胞、TOV112D细胞、Leukemic 1210细胞 
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞 
T24细胞系相关产品：KCL22S细胞、GA-10细胞、UCLA-RO 81细胞 
TOV-21G细胞系相关产品：H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞 
PJ34细胞系相关产品：P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞 
VP229细胞系相关产品：SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞 
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Soleus clone 8细胞系相关产品：Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞 
T173细胞系相关产品：Hep-G2/C3A细胞、GOS3细胞、SUNE-1细胞 
H-II-E-C3细胞系相关产品：beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞 
SGC-7901细胞系相关产品：NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞 
HCS-2/8细胞系相关产品：293 c18细胞、PVEC细胞、GM03570细胞 
CA-OV-3细胞系相关产品：HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞 
KY-50细胞系相关产品：CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞 
NCI-SNU-119细胞系相关产品：NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞 
RAMSCs细胞系相关产品：H920细胞、DHL-6细胞、A3细胞 
SNB.19细胞系相关产品：LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞 
SNB.19细胞系相关产品：LLC-MK2细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞、KYSE-180细胞 
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 
GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞 
NCI-UMC-11细胞系相关产品：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞 
C8161细胞系相关产品：H1238细胞、H196细胞、FO [Mouse myeloma]细胞 
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LA 4细胞系相关产品：T/G HA-VSMC细胞、Fao细胞、BC3H-1细胞 
Ishikawa细胞系相关产品：C166细胞、CCD19Lu细胞、SUM-102PT细胞 
NCI-H87细胞系相关产品：7404细胞、RH-35细胞、COLO824细胞 
MiaPaca.2细胞系相关产品：MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞 
OS-RC-2细胞系相关产品：NUGC2细胞、SF-767细胞、3T6细胞 
NCI-H2195细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞 
NCI-A549细胞系相关产品：M14-MEL细胞、AdHek细胞、U266 Bl细胞 
RPMI 7666细胞系相关产品：DMS 53细胞、SR-786细胞、SN12C-PM6细胞 
LC-2-Ad细胞系相关产品：SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞 
NCIH2066细胞系相关产品：CAL-62细胞、HFSF细胞、ANA1细胞 
CT-26 WT细胞系相关产品：Line 697细胞、SU-DH-L5细胞、6T-CEM细胞 
ECC-12细胞系相关产品：RCC10细胞、SW 403细胞、Hs 695T细胞 
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