SHI-1 人单核细胞白血病细胞系

"SHI-1 人单核细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性单核细胞白血病；男性 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
SHI-1 人单核细胞白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
SHI-1 人单核细胞白血病细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Danio rerio Gill细胞系相关产品：SKG-3a细胞、343MG细胞、FHs74Int细胞 
MV-1-Lu细胞系相关产品：BIU-87/Adr细胞、NOZC-1细胞、T 98 G细胞 
Sc-1细胞系相关产品：RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞 
RPMI no 8226细胞系相关产品：NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞 
NTERA-2 clone D1细胞系相关产品：NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞 
Granta-519细胞系相关产品：RMS13细胞、RPMI 8226/S细胞、SUM 102PT细胞 
KM-H2细胞系相关产品：HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞 
MES 23.5细胞系相关产品：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞 
NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞系相关产品：293GP细胞、KY70细胞、CHO-ori细胞 
MDA-PCa-2b细胞系相关产品：H-2110细胞、HT144mel细胞、MLMEC细胞 
P3/X63/Ag8细胞系相关产品：NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞 
MT-3 [Human leukocytes]细胞系相关产品：PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞 
K1细胞系相关产品：McCoy B细胞、PLA-802细胞、PNEC30细胞 
KYSE510细胞系相关产品：Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞 
hTERT-RPE1细胞系相关产品：Hs821T细胞、STTG1细胞、DR2R 1610细胞 
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞 
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞 
NCI-Hut 125细胞系相关产品：R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞 
OPM2细胞系相关产品：KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞 
L-428细胞系相关产品：NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞 
SHI-1 人单核细胞白血病细胞系
SKRC-39细胞系相关产品：H1155细胞、SPDC-CCL141细胞、MOLT-3细胞 
BC-022细胞系相关产品：EL-4细胞、COLO 206F细胞、RPMI-7666细胞 
CCD-841CoTr细胞系相关产品：Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞 
MESSADX5细胞系相关产品：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞 
ECC-10细胞系相关产品：LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞 
H2110细胞系相关产品：COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞 
CHO-K1细胞系相关产品：V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞 
HEC-151细胞系相关产品：HepG2-luc细胞、H358细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞 
THC-8307细胞系相关产品：LS 123细胞、SW-403细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞 
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞 
HBSMC细胞系相关产品：Hs 832(C).T细胞、SW1222细胞、CWR22R细胞 
GM01232细胞系相关产品：Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞 
T/GHA-VSMC细胞系相关产品：SGC-7901细胞、NCIH441细胞、KOSC2细胞 
Mv 1 Lu细胞系相关产品：Sf-21细胞、C4-1细胞、RL-65细胞 
HCAEC细胞系相关产品：NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞 
HN 4细胞系相关产品：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞 
H-220细胞系相关产品：Cor L51细胞、SV-HUC-1细胞、PK 15细胞 
A-375SM细胞系相关产品：HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞 
ECV细胞系相关产品：S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞 
Dx5细胞系相关产品：NCI-UMC-11细胞、Saos2细胞、GT39细胞 
COLO 699细胞系相关产品：TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞 
M210B4细胞系相关产品：BT-20细胞、NCIH358细胞、H-920细胞 
WM 239-A细胞系相关产品：BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞 
PLA-801D细胞系相关产品：THP1细胞、PMVEC细胞、NCIH64细胞 
PCI:SG-231细胞系相关产品：SK-ES1细胞、Hs 27细胞、Hs 706.T细胞 
H2405细胞系相关产品：BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞 
Nb2细胞系相关产品：C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞 
NCIH2342细胞系相关产品：RTMC细胞、ssMCF-7细胞、CAL148细胞 
LICR-LON-HN6-R细胞系相关产品：751细胞、VM-CUB-1细胞、IGR.OV1细胞 
Capan2细胞系相关产品：H-460细胞、KMB 17细胞、DI TNC1细胞 
MUGCHOR1细胞系相关产品：no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞 
EFO 27细胞系相关产品：TU 686细胞、Kit-225细胞、JB6 [Mouse]细胞 
CCD19-Lu细胞系相关产品：UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞 
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞 
MASMC细胞系相关产品：MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞 
SKM-1细胞系相关产品：HGMC细胞、GM00637H细胞、L cells细胞 
A-673细胞系相关产品：NCI-H2085细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、KG-1a细胞 
NCI-SNU-216细胞系相关产品：KPL4细胞、ANA-1细胞、H4-II-EC3细胞 
H-2126细胞系相关产品：A253细胞、VCaP细胞、Be Wo细胞 
UCLA-SO-M14细胞系相关产品：C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞 
RIN-m5F细胞系相关产品：NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞 
SHI-1 人单核细胞白血病细胞系
Human ErythroLeukemia细胞系相关产品：EBC-1细胞、LAN6细胞、GM3570细胞 
P-36细胞系相关产品：HCT_116细胞、Chinese Hamster Ovary细胞、VM-CUB-1细胞 
MDA436细胞系相关产品：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞 
NCIADR.RES细胞系相关产品：SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞 
MNNG-HOS细胞系相关产品：OCI-LY-3细胞、GB1细胞、TMD-8细胞 
H2110细胞系相关产品：COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞 
HOP 92细胞系相关产品：WiDr/S细胞、624mel细胞、DI-TNC1细胞 
BE2-C细胞系相关产品：HCT/FU细胞、U-2-OS细胞、NCI-841细胞 
FHs 74 Int细胞系相关产品：KPL1细胞、H-510细胞、HEC-251细胞 
NKM-1细胞系相关产品：ZYM-SVEC01细胞、GL261细胞、IHC-ST1细胞 
SUIT-2细胞系相关产品：K1735细胞、ABC1细胞、H647细胞 
Sc-1细胞系相关产品：RS 4;11细胞、HOC1细胞、MFE 296细胞 
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