MOLM-14 人急性髓系白血病细胞系

"MOLM-14 人急性髓系白血病细胞系
细胞背景资料：急性髓系白血病；男性 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MOLM-14 人急性髓系白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
贴壁细胞冻存注意事项：细胞冻存液需提前配制，不可直接将DMSO加入细胞悬液中；不同细胞消化时间有差异，以实际镜检结果为准，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，消化时间不宜过长；应选择汇合度80%-90%左右，细胞处于对数生长期时进行冻存操作，确保细胞冻存时状态，冻存密度可根据细胞特性进行调整；冻存细胞保存温度应低于-130℃，不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤：从培养箱中取出准备冻存的细胞；显微镜下观察细胞状态并拍照记录；酒精消毒培养瓶后放入安全柜中；吸去多余的培养基，加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；将细胞悬液移入15ml离心管中离心，1000rpm/min（约200g）离心3-5min；吸去多余的液体，向细胞沉淀中加入适量的冻存液，轻轻吸打混匀；按比例分装至冻存管中；贴好标签后放入梯度冻存盒中；将冻存盒放入-80℃，降温过夜后，移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项：将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用；程序降温盒复温至室温备用。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
MOLM-14 人急性髓系白血病细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCIH1618细胞系相关产品：CFSC-2G细胞、LAN1细胞、KP-N-YN细胞 
C-4 I细胞系相关产品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞、THP-1(ATCC)细胞、CCRF/CEM细胞 
RT4细胞系相关产品：U-118-MG细胞、OLN 93细胞、SVOG细胞 
HT22细胞系相关产品：Ramos细胞、Kato-III细胞、MDA-MB453细胞 
R 2 C细胞系相关产品：CCD-841-CoTr细胞、MDA-468细胞、HCEC-12细胞 
Walker256细胞系相关产品：NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞 
Duke University 4475细胞系相关产品：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞 
HUT-226细胞系相关产品：RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞 
HGBEC细胞系相关产品：BEAS-2B细胞、MGH-U1 (EJ)细胞、LNCaP C4-2B细胞 
UMNSAH-DF 1细胞系相关产品：EOL1细胞、SK.MEL.2细胞、H2052_MM细胞 
Hs839T细胞系相关产品：U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞 
HEK 293 EBNA细胞系相关产品：Rca-B细胞、Hs 683.T细胞、CHL-CL-11细胞 
EL4细胞系相关产品：MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞 
LC-2 ad细胞系相关产品：C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞 
GL261细胞系相关产品：GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞 
H498细胞系相关产品：MES-23.5细胞、NCI-H676细胞、Mel-MeWo细胞 
NIH3T3-L1细胞系相关产品：KE 37细胞、Hs294细胞、HCC38细胞 
GP293细胞系相关产品：KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞 
HCA-7细胞系相关产品：VP267细胞、Hep G2-Luc细胞、PBL细胞 
KMB-17细胞系相关产品：TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞 
MOLM-14 人急性髓系白血病细胞系
OS-732细胞系相关产品：6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞 
C-127细胞系相关产品：McARH7777细胞、TOV112细胞、BPH-1细胞 
LNCaP细胞系相关产品：Y79细胞、CCK81细胞、PE/CA-PJ34细胞 
MDA2B细胞系相关产品：WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞 
H9c2细胞系相关产品：DU_145细胞、HOS(TE85)细胞、FOX-NY细胞 
EL4细胞系相关产品：MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞 
MSTO-211 H细胞系相关产品：H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞 
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞 
SaOS细胞系相关产品：EA.Hy926细胞、RPMI #8226细胞、CWR22R-V1细胞 
OLN93细胞系相关产品：Medical Research Council cell strain-5细胞、Panc 02.03细胞、SCC 15细胞 
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞 
Pro-5 Lec1.3c细胞系相关产品：HuH28细胞、VM Cub 1细胞、HS-294T细胞 
LMH细胞系相关产品：SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞 
OVCAR-5细胞系相关产品：R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞 
UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞 
DHL-4细胞系相关产品：NTHY-ORI3.1细胞、Panc-813细胞、H2110细胞 
PC3-M细胞系相关产品：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞 
CHP100细胞系相关产品：NIH:OVCAR-5细胞、NCI-1155细胞、PLB985细胞 
MV4;11细胞系相关产品：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞 
MuM-2B细胞系相关产品：MNNG细胞、KYSE 70细胞、CL34细胞 
TE85细胞系相关产品：tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞 
TCMK1细胞系相关产品：CMT.64细胞、OCI Ly1细胞、H-23细胞 
H292细胞系相关产品：SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞 
TERT-RPE1细胞系相关产品：HT-55细胞、GM00637I细胞、H4-II-E细胞 
PC 12细胞系相关产品：RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞 
MM1.S细胞系相关产品：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞 
SL-1细胞系相关产品：C22 (Clara)细胞、H-2342细胞、HBL100细胞 
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞 
T 98 G细胞系相关产品：FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞 
OV3121细胞系相关产品：BCP-1细胞、NCI-BL1339细胞、Hs294细胞 
JROECL 21细胞系相关产品：KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞 
NCIH2228细胞系相关产品：KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞 
HIBEpiC细胞系相关产品：HEK 293A细胞、Normal Rat Kidney-52E细胞、H2107细胞 
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品：PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞 
NCIH661细胞系相关产品：YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞 
SK-RC 39细胞系相关产品：TE-15细胞、HT1080细胞、NCI.H23细胞 
CRFK细胞系相关产品：TCC-PAN2细胞、JVM3细胞、NCI.H522细胞 
HCC1500细胞系相关产品：OEC33细胞、HTR-8/SV neo细胞、H1417细胞 
MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞 
Lewis Lung细胞系相关产品：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞 
CHOS细胞系相关产品：MCF 7细胞、HBE 135-E6E7细胞、TYKnu细胞 
MOLM-14 人急性髓系白血病细胞系
NCIH747细胞系相关产品：SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞 
SNUC1细胞系相关产品：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞 
NCIH1755细胞系相关产品：FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞 
ABC-1细胞系相关产品：NCIH1869细胞、L 363细胞、NCIH1930细胞 
MLTC-1细胞系相关产品：MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞 
NCIH82细胞系相关产品：HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞 
OCILY-19细胞系相关产品：HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞 
RBMVEC细胞系相关产品：DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞 
Helacyton gartleri细胞系相关产品：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞 
LC1细胞系相关产品：PAa细胞、LIXC-002细胞、CTLL-2细胞 
RAW2647细胞系相关产品：P30/OHK细胞、MDA330细胞、DI TNC-1细胞 
RT4细胞系相关产品：U-118-MG细胞、Oregon J-111细胞、SW837细胞 
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